[發明專利]基于DNA酶SERS技術測定荸薺皮中痕量汞離子的方法

在審

• 申請號: 201910290762.2
• 申請日: 2019-04-11
• 公開（公告）號: CN110108691A
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發明（設計）人: 黎小椿;龐永豐;羅楊合;聶輝;伍淑婕;段振華
• 申請（專利權）人: 賀州學院
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N1/28;G01N1/44
• 代理公司: 深圳益諾唯創知識產權代理有限公司 44447
• 代理人: 肖婉萍

本發明公開了一種基于DNA酶SERS技術測定荸薺皮中痕量汞離子的方法，該方法包括如下步驟：制備已知濃度的Hg²⁺標準溶液體系及空白對照溶液體系，分別測定已知濃度的Hg²⁺標準溶液體系及空白對照溶液體系的SERS峰強度，計算ΔI，以ΔI對Hg²⁺的濃度關系作工作曲線，再根據上述方法測定荸薺皮中Hg²⁺的含量。SERS光譜檢測結果表明，Hg²⁺濃度與ΔI的線性回歸方程為△I＝0.8685x+17.92，R²＝0.9955，Hg²⁺濃度在2.5×10^?8～7.5×10^?7mol/L之間與ΔI線性關系良好。將其用于對荸薺皮中的Hg²⁺檢測，測得相對標準偏差均在10％以內，回收率在101?105％之間。本發明具有操作簡單、靈敏度高的特點，可用于農產品重金屬的檢測。

【技術領域】

本發明屬于分析檢測領域，具體涉及一種操作簡單、靈敏度高的基于DNA酶SERS技術測定荸薺皮中痕量汞離子的方法。

【背景技術】

汞是一種毒性很強的重金屬，汞及其化合物很容易通過食物鏈在人體內蓄積，當汞含量在人體內積累到一定程度時，就會導致中毒。長期以來，由于工業廢水的不合理排放、生活垃圾的不正確處理、化肥和化學農藥的大規模使用，使重金屬汞在農產品中大量殘留。人類長期食用受汞污染的農產品，汞在人體里蓄積，導致人體出現慢性或急性汞中毒。重金屬汞防治已經成為有關部門急需解決的問題之一。

目前國內外用于檢測重金屬離子的方法主要有：原子熒光法(AFS)、原子吸收分光光度法(AAS)、電感耦合等離子體質譜法(ICP)、激光誘導擊穿光譜法、溶出伏安法、高效液相色譜法(HPLC)、酶抑制法和表面增強拉曼散射光譜法(SERS)等。其中AAS、ICP、AFS、HPLC雖然靈敏度高，幾乎可以用于所有重金屬的檢測，但樣品前處理和檢測過程較復雜，難以實現現場或在線監測，儀器設備的安裝環境和使用維護要求較高。而表面增強拉曼散射光譜法(SERS)具有水干擾小、快速、可進行多元檢測和無需復雜的樣品前處理等優點，是一種理想的重金屬檢測新方法。然而，現有的表面增強拉曼散射光譜法測定汞離子存在操作不便、靈敏度低等缺點。因此，研究出一種操作簡單、靈敏度高的表面增強拉曼散射光譜法測定汞離子的方法就成為一種客觀需求。

【發明內容】

本發明旨在解決上述問題，而提供一種操作簡單、靈敏度高的基于DNA酶SERS技術測定荸薺皮中痕量汞離子的方法。

本發明的基于DNA酶SERS技術測定荸薺皮中痕量汞離子的方法，該方法包括如下步驟：

a、制備已知濃度的Hg²⁺標準溶液體系：于刻度試管中，依次加入30～200μL 9nmol/L雙鏈DNA溶液，10～150μL 1×10^-5mol/L的Hg²⁺標準溶液，混勻室溫下靜置8min后，加入10～500μL 19.9mg/L銀納米粒子溶液，然后加入10～50μL 4.65×10^-2mol/L混合溶液，搖勻后加入20～120μL 5.23×10^-5mol/L的羅丹明6G溶液，加水定容至2.0mL；

b、制備空白對照溶液體系：用步驟a中的方法不加Hg²⁺標準溶液制備空白對照溶液體系；

c、分別取步驟a、b制備的Hg²⁺標準溶液體系及空白對照溶液體系于石英皿中，在拉曼光譜儀上，設定儀器參數，掃描獲得體系的表面增強拉曼光譜，測定611cm^-1處的SERS峰強度I，同時測定空白對照溶液體系的SERS峰強度I₀，計算ΔI＝I₀–I；

d、以ΔI對Hg²⁺的濃度關系作工作曲線；