[發明專利]一種食品中綿羊源成分快速檢測方法及試劑盒

有效

• 申請號: 201910289658.1
• 申請日: 2019-04-11
• 公開（公告）號: CN109811066B
• 公開（公告）日: 2020-11-24
• 發明（設計）人: 許文濤;羅云波;黃昆侖;張超;杜再慧;馬玉婷
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6844;C12Q1/6804;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測食品中綿羊源成分的快速檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）待測樣品提取DNA；

（2）以提取DNA為模板，采用特異性LAMP引物組合進行LAMP檢測；

（3）結果判斷：采用膠體金核酸試紙條進行結果判斷，檢測T線和質控C線均有紅色條帶，含有目的基因；質控C線有紅色條帶，而檢測T線無條帶，不含有目的基因；

所述用于檢測食品中綿羊源成分的基因，其為內標準基因，具有SEQ ID NO.1所示的序列；

所述特異性LAMP引物組合，包括以下4條引物：

F3：	5’- CTCACTCCTCTGACAGTCCT-3’；
B3：	5’- CCTGGGGCAACAGAATGG-3’；
FIP：	5’-GCTAACCTCCAGGCCTCAGTTTGGTGGGTACTGTTACCGTCA-3’；
BIP：	5’-AGCTGAACCCTGGAAATCAGGCACTGAGGCTCAGAGAAGGT-3’；

所述的方法，其特征在于，步驟（3）所述的膠體金核酸試紙條包含膠體金核酸試紙條測試線與質控線，測試線標記有Cy5抗體，質控線標記有生物素二抗，結合墊有膠體金-生物素抗體標記物。

2.權利要求1中所述的特異性LAMP引物組合在綿羊源成分鑒定中的應用。

3.權利要求1中所述的特異性LAMP引物組合在制備綿羊源成分檢測試劑盒或檢測試劑中的應用。

4.權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）所述LAMP檢測，其25 μL LAMP檢測體系的具體配置為：1x Thermopol buffer，0.4 mM dNTP，3 mM MgSO₄，1.0 M 甜菜堿，1.6μM 引物FIP，1.6μM 引物BIP，0.2μM引物F3，0.2μM引物B3，8 U Bst DNA聚合酶大片段。

5.權利要求1所述的方法，其特征在于，LAMP檢測反應條件為：60-65℃恒溫20min，85℃5min，然后終止反應。