[發(fā)明專利]檢測(cè)血液中維生素K1含量的液質(zhì)分析方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910287337.8
• 申請(qǐng)日: 2019-04-11
• 公開（公告）號(hào): CN109959740A
• 公開（公告）日: 2019-07-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉春冉;佟洪梅;賈永娟;倪君君
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京和合醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/72;G01N30/04;G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 北京雙收知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11241
• 代理人: 解政文

本發(fā)明檢測(cè)血液中維生素K1含量的液質(zhì)分析方法是使用高效液相色譜三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行標(biāo)定，擬合得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y＝a*x+b，取待測(cè)血液樣品，在該待檢測(cè)血液經(jīng)過(guò)處理后，同樣使用高效液相色譜三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀對(duì)待測(cè)的樣品進(jìn)行檢測(cè)，得到待測(cè)血液y值，將待測(cè)血液y代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中，通過(guò)計(jì)算得到待測(cè)血液樣品中維生素K1的相對(duì)濃度x，內(nèi)標(biāo)物工作液中維生素K1同位素濃度是已知的，由此計(jì)算得到該樣本中待檢測(cè)血液中的維生素K1的濃度，本發(fā)明血清樣本經(jīng)液液萃取前處理后進(jìn)樣分析，檢測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)便快速，檢測(cè)靈敏度高，更利于在臨床治療中對(duì)患者體內(nèi)的維生素K1含量進(jìn)行測(cè)定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及脂溶性維生素的臨床含量濃度監(jiān)測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種檢測(cè)血液中維生素K1含量的方法。

背景技術(shù)

維生素K1，分子式為C31H46O2，具體化學(xué)結(jié)構(gòu)如下圖1所示。維生素K1為肝內(nèi)合成凝血酶原的必需物質(zhì)，當(dāng)缺乏時(shí)可造成凝血障礙。當(dāng)血液中維生素K1注射液凝血酶原缺乏時(shí)，血液的凝固就會(huì)出現(xiàn)遲緩，這時(shí)補(bǔ)充適量的維生素K1可促使肝臟合成凝血酶原，起到止血的作用。維生素K1作為醫(yī)藥制劑，在臨床上應(yīng)用于凝血酶過(guò)低癥、維生素K1缺乏癥、新生兒自然出血癥的防治以及梗阻性黃疸、膽瘺、慢性腹瀉等所致出血，香豆素類、水楊酸鈉等所致的低凝血酶原血癥。維生素還具有鎮(zhèn)痛、緩解支氣管痙攣的作用，對(duì)內(nèi)臟平滑肌絞痛、膽管痙攣、腸痙攣引起的絞痛有明顯的效果，維生素K1還可以用于多維食品的添加劑。

目前常用的維生素K1的測(cè)定方法眾多，各有優(yōu)缺點(diǎn)，包括高效液相色譜法、免疫法、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法等。液相色譜法檢測(cè)時(shí)，前處理過(guò)程復(fù)雜，并且靈敏度低。免疫法檢測(cè)時(shí)，前處理過(guò)程較簡(jiǎn)單，并且分析時(shí)間短但靈敏度低、專屬性差。液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定維生素含量具有定量準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好、靈敏度高、專屬性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，但目前仍存在前處理復(fù)雜，分析時(shí)間較長(zhǎng)等問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明目的是提供一種檢測(cè)血液中維生素K1含量的液質(zhì)分析方法，使維生素K1含量的測(cè)定快速準(zhǔn)確，前處理操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，精確定量相關(guān)物質(zhì)并且可以廣泛適用。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

本發(fā)明的一種檢測(cè)血液中維生素K1含量的液質(zhì)分析方法，其中：它包括以下步驟：

(一)、標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定

(a)、標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制：

精確稱維生素K1標(biāo)準(zhǔn)品15.46mg置于10mL容量瓶中，用10mL純甲醇溶解并定容至刻度，得到標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液A，將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液A用含水量為5％-15％的甲醇溶液進(jìn)行稀釋，分別在含有0.5-5000ng/mL維生素K1的濃度范圍內(nèi)配制出各濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，并在-80℃條件下保存；

(b)、標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)標(biāo)液的配制：

精確稱取維生素K1同位素內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品1.00mg于1mL容量瓶中，用1mL純甲醇溶解并定容至刻度，得到內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液B，將內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液B用含水量為5％-15％的甲醇溶液進(jìn)行稀釋，得到含有維生素K1同位素的濃度為10ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)標(biāo)液，并在-80℃條件下保存；

(c)、用標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程