[發(fā)明專利]一種羊胚胎素蛋白小肽及其制備工藝

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910283451.3
• 申請(qǐng)日: 2019-04-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109971810A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-07-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李萬(wàn)千;李靜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 長(zhǎng)沙嘉蘭生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12P21/06
• 分類號(hào): C12P21/06;C07K1/16
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明屬于生物制品技術(shù)領(lǐng)域，尤其為一種羊胚胎素蛋白小肽及其制備工藝，針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝復(fù)雜、酶解耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)的問(wèn)題，現(xiàn)提出如下方案，其中羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝包括以下步驟：S1：原料預(yù)處理：按重量比為5：6~8的比例稱取新鮮的羊胚胎及羊胎盤作為原料，利用去離子水對(duì)原料進(jìn)行清洗，原料清洗后對(duì)其進(jìn)行切段處理，得到肉段；S2：添加輔料：選取一臺(tái)電子天平，使用電子天平稱取珍珠粉，珍珠粉用量為肉段總量的15%~25%。本發(fā)明設(shè)計(jì)合理，能夠大幅度增加羊胚胎及羊胎盤原料的細(xì)胞組織面積，降低蛋白酶的消耗，提高蛋白酶濃度、增加酶解速率，方便快速制得羊胚胎素蛋白小肽等物質(zhì)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物制品技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種羊胚胎素蛋白小肽及其制備工藝。

背景技術(shù)

胎盤又名“紫河車”，為常用中藥，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明：胎盤含有多種免疫球蛋白、活性肽等生物活性物質(zhì)及氨基酸、礦物質(zhì)等成分(統(tǒng)稱活細(xì)胞素)，是一種機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)劑和營(yíng)養(yǎng)、美容保健品。科學(xué)家對(duì)多種動(dòng)物胎盤進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，羊胎盤的細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)與人胎盤最為相似，可望成為同人類胎盤具有同等養(yǎng)生價(jià)值的替代物。經(jīng)檢索，申請(qǐng)?zhí)枮?01110193938.6的專利文件公開(kāi)了一種羊胚胎及羊胎盤生物制品及其制備方法，該方法包括以下的步驟:1）羊胚胎及羊胎盤原料前處理；2）羊胚胎及羊胎盤超微粉碎、細(xì)胞破壁；3）羊胚胎及羊胎盤的提取和酶解；4）采用葡聚糖凝膠根據(jù)分子量大小對(duì)上述步驟3）中得到的羊胎及羊胎盤素原液進(jìn)行分級(jí)精制，得到氨基酸、小分子多肽和各種分子量蛋白的精制羊胎素。采用上述方法制得的羊胚胎及羊胎盤素的精制羊胎素，既保留胎盤中的天然活性物質(zhì)，又增加其多肽及氨基酸含。

但是現(xiàn)有技術(shù)中制備羊胚胎素蛋白小肽時(shí)工藝較為復(fù)雜，且蛋白酶消耗量較大、酶解耗費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)、經(jīng)濟(jì)成本高，不利于進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)，因此我們提出了一種羊胚胎素蛋白小肽及其制備工藝用于解決上述問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決有技術(shù)中制備羊胚胎素蛋白小肽時(shí)工藝復(fù)雜、蛋白酶消耗量較大、酶解耗費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)的缺點(diǎn)，而提出的一種羊胚胎素蛋白小肽及其制備工藝。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：

一種羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝，包括以下步驟：

S1：原料預(yù)處理：按重量比為5：6~8的比例稱取新鮮的羊胚胎及羊胎盤作為原料，利用去離子水對(duì)原料進(jìn)行清洗，原料清洗后對(duì)其進(jìn)行切段處理，得到肉段；

S2：添加輔料：選取一臺(tái)電子天平，使用電子天平稱取珍珠粉，珍珠粉用量為S1中所述肉段總量的15%~25%，將稱量得到的珍珠粉清洗后加入到S1中所述肉段中并進(jìn)行攪拌混合，得到混合料；

S3：研磨：選取一臺(tái)研磨設(shè)備，將S2中所述的混合料投放到研磨設(shè)備內(nèi)進(jìn)行研磨處理，研磨時(shí)間為15~25分鐘，研磨壓力為0.2~0.5MPa,得到肉糜；

S4：離心：選取一臺(tái)離心機(jī)，將S3所述的肉糜等量注入多個(gè)試管內(nèi)，并將試管置于離心機(jī)內(nèi)進(jìn)行離心處理，待肉糜離心結(jié)束后取所有試管中的上層清液，得到組織液；取所有試管中的下層濁液，得到組織濁液；

S5：配制酶解液：利用電子天平稱取復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的用量為S4中所述組織濁液總量的3%~5%，將稱量得到的復(fù)合蛋白酶投放到S4中所述的組織濁液內(nèi)，并向其中注入去離子水，去離子水的注入量為組織濁液總量的200%~300%，酶解時(shí)間為150~240分鐘；

S6：投入組織液：待S5中所述的組織濁液酶解完成時(shí)，將S4中所述的組織液投放到S5中酶解完成的組織濁液中，并進(jìn)行攪拌，攪拌時(shí)間為45~90分鐘，得到原液；

S7：選取層析柱：選取長(zhǎng)度為80~120厘米、長(zhǎng)度與直徑比為5~11的瓊脂糖層析柱，利用層析柱對(duì)S6中所述的原液進(jìn)行分級(jí)精制，得到氨基酸、小分子多肽和各種分子量蛋白的精制羊胎素。