[發(fā)明專利]一種羊胚胎素蛋白小肽及其制備工藝

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910283451.3
• 申請日: 2019-04-10
• 公開（公告）號: CN109971810A
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李萬千;李靜
• 申請（專利權(quán)）人: 長沙嘉蘭生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝，其特征在于，包括以下步驟：

S1：原料預(yù)處理：按重量比為5：6~8的比例稱取新鮮的羊胚胎及羊胎盤作為原料，利用去離子水對原料進行清洗，原料清洗后對其進行切段處理，得到肉段；

S2：添加輔料：選取一臺電子天平，使用電子天平稱取珍珠粉，珍珠粉用量為S1中所述肉段總量的15%~25%，將稱量得到的珍珠粉清洗后加入到S1中所述肉段中并進行攪拌混合，得到混合料；

S3：研磨：選取一臺研磨設(shè)備，將S2中所述的混合料投放到研磨設(shè)備內(nèi)進行研磨處理，研磨時間為15~25分鐘，研磨壓力為0.2~0.5MPa,得到肉糜；

S4：離心：選取一臺離心機，將S3所述的肉糜等量注入多個試管內(nèi)，并將試管置于離心機內(nèi)進行離心處理，待肉糜離心結(jié)束后取所有試管中的上層清液，得到組織液；取所有試管中的下層濁液，得到組織濁液；

S5：配制酶解液：利用電子天平稱取復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的用量為S4中所述組織濁液總量的3%~5%，將稱量得到的復(fù)合蛋白酶投放到S4中所述的組織濁液內(nèi)，并向其中注入去離子水，去離子水的注入量為組織濁液總量的200%~300%，酶解時間為150~240分鐘；

S6：投入組織液：待S5中所述的組織濁液酶解完成時，將S4中所述的組織液投放到S5中酶解完成的組織濁液中，并進行攪拌，攪拌時間為45~90分鐘，得到原液；

S7：選取層析柱：選取長度為80~120厘米、長度與直徑比為5~11的瓊脂糖層析柱，利用層析柱對S6中所述的原液進行分級精制，得到氨基酸、小分子多肽和各種分子量蛋白的精制羊胎素。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝，其特征在于，所述S1中，在對原料進行切段處理時，切段的寬度為1~3厘米，切段的長度為4~8厘米。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝，其特征在于，所述S3中，在對肉段進行研磨前，使用去離子水對研磨設(shè)備進行清洗，待研磨設(shè)備干燥后再對肉段進行研磨工作。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝，其特征在于，所述S4中，在對肉糜進行離心處理時，離心時間為10~15分鐘，離心轉(zhuǎn)速為800-1200轉(zhuǎn)/分鐘。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝，其特征在于，所述S5中，在對組織濁液進行酶解時，酶解溫度為50-55攝氏度。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝，其特征在于，所述S5中，在配制酶解液時，復(fù)合蛋白酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、組織蛋白酶和木瓜蛋白酶混合而成。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種羊胚胎素蛋白小肽的制備工藝，其特征在于，所述復(fù)合蛋白酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、組織蛋白酶、木瓜蛋白酶按照重量比為0.4：1:1.2：0.8配制而成。

8.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4或5或6或7所述的工藝制備得到的羊胚胎素蛋白小肽。