[發明專利]一種巴斯德畢赤酵母及其應用

在審

• 申請號: 201910281043.4
• 申請日: 2019-04-09
• 公開（公告）號: CN111793568A
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: 李俊;李慧;章漳;蔣丹丹
• 申請（專利權）人: 伽藍（集團）股份有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12N1/38;C12P21/02;C07K14/78;A61K8/9728;A61Q19/00;C12R1/84
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦;呂學辰

1.一種巴斯德畢赤酵母(Pichia pastoris)，其特征在于，其保藏編號為CCTCC NO:M2016763。

2.一種緊密連接蛋白ZO-1、層粘連蛋白和/或纖連蛋白的基因表達上調劑，其特征在于，所述的基因表達上調劑的制備方法包括：在培養基中培養權利要求1中所述的巴斯德畢赤酵母，獲得發酵產物后離心并收集上清即得；

所述的層粘連蛋白優選層粘連蛋白332。

3.如權利要求2所述的基因表達上調劑，其特征在于，所述的培養基為BMMY培養基，其包括2wt％蛋白胨、1wt％酵母提取物、100mM磷酸鉀緩沖液、1.34wt％YNB、4×10^-5wt％生物素以及0.5v/v％甲醇，余量為水；所述磷酸鉀緩沖液的pH為6.0；

所述培養的時間為2～4天；

所述培養的溫度為25～30℃；

所述培養為震蕩培養，所述震蕩培養的速度優選200～300rpm，更優選250rpm；

和/或，所述培養的接種量為2～10v/v％，優選5v/v％。

4.如權利要求2或3所述的基因表達上調劑，其特征在于，在所述培養過程中，每24小時補加0.1～2.0v/v％甲醇；較佳地為每24小時補加0.5v/v％甲醇；

和/或，在所述的培養前，還包括使用種子培養基進行種子培養的步驟；所述種子培養的時間為16～18小時，所述種子培養的溫度為30℃。

5.如權利要求4所述的基因表達上調劑，其特征在于，所述種子培養為震蕩培養，所述震蕩培養的轉速優選250rpm。

6.如權利要求1所述的巴斯德畢赤酵母在制備緊密連接蛋白ZO-1、層粘連蛋白和/或纖連蛋白的基因表達上調劑中的應用；所述的層粘連蛋白優選層粘連蛋白332。

7.如權利要求6所述的應用，其特征在于，培養所述的巴斯德畢赤酵母獲得其發酵產物，利用所述的發酵產物制備所述基因表達上調劑。

8.如權利要求6或7所述的應用，其特征在于，所述基因表達上調劑適用于化妝品或者護膚品中。

9.一種緊密連接蛋白ZO-1、層粘連蛋白和/或纖連蛋白的基因表達上調劑的制備方法，其特征在于，所述的制備方法包括培養如權利要求1所述的巴斯德畢赤酵母，獲得其發酵產物后離心并收集上清即得；

所述的層粘連蛋白優選層粘連蛋白332。

10.如權利要求9所述的制備方法，所述的基因表達上調劑適用于化妝品或者護膚品中。