[發明專利]果糖基賴氨酸的測定方法在審
| 申請號： | 201910279861.0 | 申請日： | 2019-04-09 |
| 公開（公告）號： | CN110358807A | 公開（公告）日： | 2019-10-22 |
| 發明（設計）人： | 佐藤大祐;竹中涼 | 申請（專利權）人： | 池田食研株式會社 |
| 主分類號： | C12Q1/48 | 分類號： | C12Q1/48;C12N9/12;C12N9/96 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人： | 苗堃;金世煜 |
| 地址： | 日本*** | 國省代碼： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 果糖基賴氨酸 反應性 果糖基纈氨酸 底物特異性 溫度穩定性 激酶反應 比活性 果糖胺 磷酸化 磷酸 | ||
1.一種果糖基賴氨酸的測定方法，其特征在于，使被檢試樣與具有以下的特性(a)～(f)的果糖胺-6-激酶反應，
(a)在ATP存在下，將果糖基賴氨酸進行磷酸化而生成果糖基賴氨酸-6-磷酸；
(b)比活性：10U/mg以上；
(c)底物特異性：將對果糖基賴氨酸的反應性設為100％時，對果糖基纈氨酸的反應性為5％以下；
(d)分子量：25kDa～35kDa；
(e)pH穩定性：在6.5～8.0穩定；
(f)溫度穩定性：在30℃穩定。
2.根據權利要求1所述的果糖基賴氨酸的測定方法，其中，果糖胺-6-激酶進一步具有以下的特性(g)和(h)，
(g)最適活性pH：8.0～8.5，
(h)最適活性溫度：35～40℃。
3.根據權利要求1或2所述的果糖基賴氨酸的測定方法，其特征在于，測定溫度為35℃以上。
4.根據權利要求1～3中任一項所述的果糖基賴氨酸的測定方法，其特征在于，在pH5.0～9.0的范圍內測定。
5.一種果糖基賴氨酸測定用試劑，含有具有以下的特性(a)～(f)的果糖胺-6-激酶，
(a)在ATP存在下，將果糖基賴氨酸進行磷酸化而生成果糖基賴氨酸-6-磷酸；
(b)比活性：10U/mg以上；
(c)底物特異性：將對果糖基賴氨酸的反應性設為100％時，對果糖基纈氨酸的反應性為5％以下；
(d)分子量：25kDa～35kDa；
(e)pH穩定性：在6.5～8.0穩定；
(f)溫度穩定性：在30℃穩定。
6.根據權利要求5所述的果糖基賴氨酸測定用試劑，其中，果糖胺-6-激酶進一步具有以下的特性(g)和(h)，
(g)最適活性pH：8.0～8.5，
(h)最適活性溫度：35～40℃。
7.一種果糖基賴氨酸測定用試劑盒，包含具有以下的特性(a)～(f)的果糖胺-6-激酶，
(a)在ATP存在下，將果糖基賴氨酸進行磷酸化而生成果糖基賴氨酸-6-磷酸；
(b)比活性：10U/mg以上；
(c)底物特異性：將對果糖基賴氨酸的反應性設為100％時，對果糖基纈氨酸的反應性為5％以下；
(d)分子量：25kDa～35kDa；
(e)pH穩定性：在6.5～8.0穩定；
(f)溫度穩定性：在30℃穩定。
8.根據權利要求7所述的果糖基賴氨酸測定用試劑盒，其中，果糖胺-6-激酶進一步具有以下的特性(g)和(h)，
(g)最適活性pH：8.0～8.5，
(h)最適活性溫度：35～40℃。
9.一種果糖胺-6-激酶，具有以下的特性(a)～(f)，
(a)在ATP存在下，將果糖基賴氨酸進行磷酸化而生成果糖基賴氨酸-6-磷酸；
(b)比活性：10U/mg以上；
(c)底物特異性：將對果糖基賴氨酸的反應性設為100％時，對果糖基纈氨酸的反應性為5％以下；
(d)分子量：25kDa～35kDa；
(e)pH穩定性：在6.5～8.0穩定；
(f)溫度穩定性：在30℃穩定。
10.根據權利要求9所述的果糖胺-6-激酶，其進一步具有以下的特性(g)和(h)，
(g)最適活性pH：8.0～8.5，
(h)最適活性溫度：35～40℃。
11.一種果糖胺-6-激酶的制造方法，其特征在于，培養屬于克洛諾菌屬、亞特蘭大桿菌屬、沙雷菌屬、芽孢桿菌屬或埃希菌屬的微生物，從培養物中提取權利要求9或10所述的果糖胺-6-激酶。
12.一種權利要求9或10所述的果糖胺-6-激酶的穩定化方法，其特征在于，將pH調節為5.0～9.0。
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