[發(fā)明專利]一種香石蒜組織培養(yǎng)方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910275458.0 | 申請日： | 2019-04-08 |
| 公開（公告）號： | CN109984039B | 公開（公告）日： | 2020-07-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張鳳姣;王忠;孫海楠;王濤;莊維兵;束曉春 | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇省中國科學(xué)院植物研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務(wù)所 11569 | 代理人： | 趙曉琳 |
| 地址： | 211200 江蘇省南京市溧水縣白*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 石蒜 組織培養(yǎng) 方法 | ||
本發(fā)明涉及一種香石蒜組織培養(yǎng)方法，屬于植物組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的香石蒜組織培養(yǎng)方法包括以下步驟：(1)將滅菌處理后的香石蒜鱗莖接種到叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到第一小鱗莖；(2)將第一小鱗莖接種到愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行誘導(dǎo)愈傷培養(yǎng)，得到愈傷團塊；(3)將愈傷團塊接種到愈傷分化培養(yǎng)基上進行分化培養(yǎng)，得到第二小鱗莖；(4)將第二小鱗莖接種到壯芽生根培養(yǎng)基上進行壯芽生根培養(yǎng)。本發(fā)明提供的培養(yǎng)方法安全性高，分化能力強，能夠?qū)崿F(xiàn)香石蒜的高效繁殖。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種香石蒜組織培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)
石蒜屬植物共有20多種，其中15種分布在中國，有‘花葉不相見’的特殊觀賞性狀，也被譽為“中國郁金香”，在全世界都是非常受歡迎的球根花卉。石蒜通常用分球、鱗莖基底切割和組織培養(yǎng)等方法繁殖，分球和鱗莖基底切割方法簡單易行，但繁殖系數(shù)不高、速度慢，很難滿足近年來對石蒜種球的大量需求，因此，通過組織培養(yǎng)快速繁殖是獲得大量石蒜種球的有效途徑。
目前對石蒜屬植物的組織培養(yǎng)研究已有較多報道，但由于種間差異大，在愈傷誘導(dǎo)和分化階段所用植物激素種類和濃度會直接影響到組織培養(yǎng)的成敗和繁殖系數(shù)，因此，建立完善的不同種的組織培養(yǎng)快繁體系對高效獲得大量石蒜屬植物非常重要。據(jù)報道，目前已建立起組織培養(yǎng)快繁體系的種類有：石蒜、乳白石蒜、長筒石蒜、紅藍石蒜、中國石蒜、忽地笑和安徽石蒜，其他種也有相關(guān)研究進展，但并未見成熟、高效的繁殖體系。
香石蒜是石蒜屬中稀有的一種自然雜交后代，其特征在于花蕾有紅色條紋，盛開后花瓣腹面有粉紅色中線、背面有一條紅色的條紋，并且是石蒜屬植物中少有的具香氣的種，有很高的觀賞價值。但由于其分布區(qū)局限，種球數(shù)量少且不能通過種子繁殖，導(dǎo)致對這一優(yōu)良品種的園林應(yīng)用較為滯后。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種香石蒜組織培養(yǎng)方法。本發(fā)明提供的培養(yǎng)方法安全性高，分化能力強，能夠?qū)崿F(xiàn)香石蒜的高效繁殖。
本發(fā)明提供了一種香石蒜組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
(1)將滅菌處理后的香石蒜鱗莖接種到叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行誘導(dǎo)培養(yǎng)30d以上，得到第一小鱗莖；所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，還包括3.0mg/L的6-BA和0.5mg/L的NAA，所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中蔗糖的濃度為30g/L，瓊脂的濃度為7.5g/L，pH值為5.9；所述滅菌處理包括用質(zhì)量分數(shù)為4％的次氯酸鈉消毒15min；
(2)將步驟(1)得到的第一小鱗莖接種到愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行誘導(dǎo)愈傷培養(yǎng)30～40d，得到愈傷團塊；所述愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，還包括1.5mg/L的2,4-D和0.2mg/L的6-BA，所述愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基中蔗糖的濃度為30g/L，瓊脂的濃度為7.5g/L，pH值為5.9；
(3)將步驟(2)得到的愈傷團塊接種到愈傷分化培養(yǎng)基上進行分化培養(yǎng)20d以上，得到第二小鱗莖；所述愈傷分化培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，還包括2.0mg/L的6-BA和0.5mg/L的NAA，所述愈傷分化培養(yǎng)基中蔗糖的濃度為30g/L，瓊脂的濃度為7.5g/L，pH值為5.9；
(4)將步驟(3)得到的第二小鱗莖接種到壯芽生根培養(yǎng)基上進行壯芽生根培養(yǎng)25～35d；所述壯芽生根培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，還包括0.4mg/L的6-BA和0.2mg/L的NAA，所述壯芽生根培養(yǎng)基中蔗糖的濃度為30g/L，瓊脂的濃度為7.5g/L，pH值為5.9。
優(yōu)選的是，步驟(1)所述滅菌處理包括以下步驟：
1)去除香石蒜鱗莖的根系和外層包皮，切除鱗莖上部，保留鱗莖盤基部，剔除鱗莖盤基部外部2～3層鱗片，沿鱗莖盤中間切開，得到兩個小塊；
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