[發明專利]一種香石蒜組織培養方法有效
| 申請號： | 201910275458.0 | 申請日： | 2019-04-08 |
| 公開（公告）號： | CN109984039B | 公開（公告）日： | 2020-07-28 |
| 發明（設計）人： | 張鳳姣;王忠;孫海楠;王濤;莊維兵;束曉春 | 申請（專利權）人： | 江蘇省中國科學院植物研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 趙曉琳 |
| 地址： | 211200 江蘇省南京市溧水縣白*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 石蒜 組織培養 方法 | ||
1.一種香石蒜組織培養方法，包括以下步驟：
（1）將滅菌處理后的香石蒜鱗莖接種到叢生芽誘導培養基中進行誘導培養30d以上，得到第一小鱗莖；所述叢生芽誘導培養基以MS培養基為基礎，添加3.0 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA，所述叢生芽誘導培養基中蔗糖的濃度為30 g/L，瓊脂的濃度為7.5 g/L，pH值為5.9；所述滅菌處理包括用質量分數為4%的次氯酸鈉消毒15 min；
所述接種的方法包括：
a）將滅菌處理后的香石蒜鱗莖縱向切割，得到切割后的香石蒜；所述切割后的香石蒜的寬度為0.5~1 cm，高度為1~1.5 cm；
b）將切割后的香石蒜的帶鱗莖盤的一端插入到叢生芽誘導培養基中；
（2）將步驟（1）得到的第一小鱗莖接種到愈傷誘導培養基上進行誘導愈傷培養30~40d，得到愈傷團塊；所述愈傷誘導培養基以MS培養基為基礎，添加1.5 mg/L的2,4-D和0.2 mg/L的6-BA，所述愈傷誘導培養基中蔗糖的濃度為30 g/L，瓊脂的濃度為7.5 g/L，pH值為5.9；
（3）將步驟（2）得到的愈傷團塊接種到愈傷分化培養基上進行分化培養20d以上，得到第二小鱗莖；所述愈傷分化培養基以MS培養基為基礎，添加2.0 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA，所述愈傷分化培養基中蔗糖的濃度為30 g/L，瓊脂的濃度為7.5 g/L，pH值為5.9；
（4）將步驟（3）得到的第二小鱗莖接種到壯芽生根培養基上進行壯芽生根培養25~35d；所述壯芽生根培養基以MS培養基為基礎，添加0.4 mg/L的6-BA和0.2 mg/L的NAA，所述壯芽生根培養基中蔗糖的濃度為30 g/L，瓊脂的濃度為7.5 g/L，pH值為5.9。
2.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于，步驟（1）所述滅菌處理包括以下步驟：
1）去除香石蒜鱗莖的根系和外層包皮，切除鱗莖上部，保留鱗莖盤基部，剔除鱗莖盤基部外部2~3層鱗片，沿鱗莖盤中間切開，得到兩個小塊；
2）將步驟1）得到的兩個小塊用流水沖洗，在含質量分數為0.1% Tween 20的水溶液中浸泡30 min，清水沖洗2~3遍后用體積分數為75％的酒精消毒30 s，用質量分數為4%的次氯酸鈉消毒15 min，用無菌水清洗4~5次，5 min/次。
3.根據權利要求2所述的培養方法，其特征在于，步驟1）所述鱗莖上部占所述石蒜鱗莖體積的2/3~3/4。
4.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于，所述培養方法的培養溫度為24~26℃。
5.根據權利要求1所述的培養方法，其特征在于，所述培養方法的光照時間為12~14 h/d，光照強度為1800~2500 lx。
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