[發明專利]一種脂聯素檢測試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 201910261668.4
• 申請日: 2019-04-02
• 公開（公告）號: CN110007091A
• 公開（公告）日: 2019-07-12
• 發明（設計）人: 朱永良;陳佳明;周沛沛;鄭毓婕
• 申請（專利權）人: 杭州博譜醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/74
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

本發明屬于醫學檢驗領域，具體涉及一種人體內脂聯素含量的檢測試劑盒，其包括試劑R1以及試劑R2；試劑R1為包被脂聯素單抗1的膠乳顆粒；試劑R2為包被脂聯素單抗2的膠乳顆粒。本發明克服了現有的膠乳免疫比濁法脂聯素檢測試劑盒中試劑R1以及試劑R2在使用過程中會出現混合不均的現象，導致試劑空白以及反應幅度波動，同時試劑R2中的多抗會與Ⅷ型膠原、補體C1q和Ⅷ因子有交叉反應，影響測試結果準確性，本發明中的試劑R1以及R2均為膠乳試劑，提升兩者的混合均勻性，避免出現試劑空白以及反應幅度大幅波動的現象；通過將脂聯素單抗替換傳統試劑中使用的脂聯素多抗，避免了額外的交叉反應，提升了試劑的檢測精確性以及穩定性。

技術領域

本發明屬于醫學檢驗領域，具體涉及一種人體內脂聯素含量的檢測試劑盒及其制備方法。

背景技術

脂聯素(Adiponectin/ADPN)是脂肪細胞分泌的一種內源性生物活性多肽或蛋白質。脂聯素是一種胰島素增敏激素(An Insulin-sensitizing Hormone)，能改善小鼠的胰島素抗性(Insulin resistance)和動脈硬化癥；對人體的研究發現，脂聯素水平能預示II型糖尿病和冠心病的發展，并在臨床試驗表現出抗糖尿病、抗動脈粥樣和炎癥的潛力。測定血中脂聯素水平，對這些疾病的診斷和預后有重要意義。

穩定性作為體外診斷試劑保持產品安全有效的重要指標，對產品的生產、運輸、保存和使用等環節具有重要的指導意義。脂聯素的檢測方法主要包括：酶聯免疫分析法、放射免疫分析法、化學發光法等。但是，這些方法的缺點也十分明顯，操作繁瑣，耗時長，易受人為操作和外界因素干擾，自動化程度低，而且放射性標記物會對操作者產生危害，對環境造成污染等。

因此，目前許多公司開始采用膠乳增強免疫比濁法，其基本原理是一定粒徑膠乳顆粒的表面交聯單克隆或多克隆抗體，當交聯有抗體的微球與抗原結合后，在短時間內會迅速聚集在一起，改變了反應液的吸光度。而且，這種改變與被測抗原的濃度有較強的相關性，在一定范圍內可以反映被測抗原的濃度。

此技術通過顆粒增強的方式，放大了抗原抗體反應，彌補了普通透射比濁法靈敏度不高的不足，同時又繼承了透射比濁法穩定性好、方便快速的優點，克服ELISA和RIA方法的缺點，已越來越廣泛應用于臨床上各種微量蛋白的定量檢測。

常規的膠乳免疫比濁法(例如授權公告號為CN 103777023B的納米膠乳增強免疫比濁法測定脂聯素的試劑盒、授權公告號為CN 104237522B的脂聯素含量檢測試劑盒及其制備方法)的R1是透明澄清的緩沖液，R2是交聯著抗體的膠乳顆粒，此方法在檢測時很有可能因為混合不均導致試劑空白和反應幅度有所波動，并且此方法的R2中交聯的抗體一般是多抗，然而血液中Ⅷ型膠原、補體C1q和Ⅷ因子有交叉反應，最終導致測試結果準確性較差。

發明內容

本發明是為了克服現有技術中的膠乳免疫比濁法脂聯素檢測試劑盒試劑R1以及試劑R2在使用過程中會出現混合不均的現象，從而導致試劑空白以及反應幅度波動，同時現有技術中的試劑R2中的多抗會與Ⅷ型膠原、補體C1q和Ⅷ因子有交叉反應，從而影響最終測試結果的準確性的缺陷，通過改善R1、R2的配方將試劑R1與試劑R2均設置為膠乳試劑并分別在R1和R2上交聯脂聯素單抗，從而提高了兩者的混合性，使得其穩定性以及試劑性能大大提升。

為實現上述發明目的，本發明通過以下技術方案實現：

一種脂聯素檢測試劑盒，所述的試劑盒包括試劑R1以及試劑R2；

所述的試劑R1為包被脂聯素單抗1(Adiponectin Monoclonal Antibody)的膠乳顆粒；

所述的試劑R2為包被脂聯素單抗2(Mouse Anti-Human Adiponectin)的膠乳顆粒。