[發明專利]一種均相化學發光法檢測促甲狀腺激素的試劑盒在審
| 申請號： | 201910254835.2 | 申請日： | 2019-04-01 |
| 公開（公告）號： | CN109884325A | 公開（公告）日： | 2019-06-14 |
| 發明（設計）人： | 成舜 | 申請（專利權）人： | 常州普林森科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/78 | 分類號： | G01N33/78;G01N33/58;G01N33/532;G01N21/76 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 213000 江蘇省常州市武進區延政西大道8*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 甲狀腺激素 試劑盒 檢測 化學發光 抗體 化學發光法檢測 吖啶衍生物 抗體制備 靈敏度 夾心法 簡易 芯片 血液 | ||
1.一種能夠同時檢測促甲狀腺激素（TSH）濃度的試劑盒，所述方案通過如下步驟實現：（1）TSH抗體制備；（2）吖啶衍生物標記TSH抗體；（3）Fermin標記TSH抗體；（4）夾心法檢測。
2.根據權利要求1所述的芯片，其特征在于步驟（2）中所述吖啶衍生物標記TSH抗體的方法為：
（1）將多聚賴氨酸溶解于1mL10-200mM PBS緩沖液（pH7.4）中，終濃度5-20nmol/L，加入10μL溶解于DMSO溶劑的5-20mmol/L吖啶酯，于25℃反應0.5-2h，用5mL 7KD截留分子量的脫鹽柱（Thermo fish公司)以10-200mM PBS（pH7.4）緩沖液作為換液緩沖液，過柱3遍，除去游離的吖啶酯及反應副產物，得到吖啶-多聚賴氨酸溶液；
（2）向上述純化過的吖啶-多聚賴氨酸溶液中加入EDC(終濃度為2-10mmol/L)和NHS(終濃度為5-20mmol/L )；加入25℃反應15-45分鐘后，加入終濃度為5-20mM的巰基乙醇，得到活化后的吖啶-多聚賴氨酸；
（3）在加入1mg抗TSH抗體，混勻，置于25℃反應0.5-2h，用5mL 7KD截留分子量的脫鹽柱(Thermofish公司)以10-200mM PBS（pH7.4）緩沖液作為換液緩沖液，過柱3遍，除去游離的NHS及反應副產物，得到結合物吖啶酯-多聚賴氨酸-TSH抗體溶液。
3.根據權利要求1所述的芯片，其特征在于步驟（3）中所述hemin標記TSH抗體的方法為：
（1）在5-20mmol/L hemin水溶液中加入NHS(終濃度為5-20mmol/L )；加入25℃反應15-45分鐘后，加入終濃度為5-20mM的巰基乙醇，得到活化后的氯化血紅素；
（2）在加入1mg抗TSH抗體，混勻，置于25℃反應0.5-2h，用5mL 7KD截留分子量的脫鹽柱(Thermofish公司)以10-200mM PBS( pH 7 .4)緩沖液作為換液緩沖液，過柱3遍，除去游離的NHS及反應副產物，得到結合物氯化血紅素-TSH抗體溶液。
4.一種權利要求1~3任一項所述試劑盒的應用，其特征在于將所述試劑制成試劑盒。
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