[發(fā)明專利]老窖梭狀芽孢桿菌及其用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910251350.8
• 申請(qǐng)日: 2019-03-29
• 公開（公告）號(hào): CN109971681B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許正宏;沈才洪;王松濤;陸震鳴;柴麗娟;張曉娟;史勁松;徐鵬翔
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 瀘州品創(chuàng)科技有限公司;江南大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12P7/40;C12P7/52;C12P7/54;C12P7/22;C12R1/145
• 代理公司: 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所(普通合伙) 51124
• 代理人: 梁鑫

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是目前沒(méi)有既能生產(chǎn)短鏈脂肪酸，也能生產(chǎn)4?甲基苯酚的梭狀芽孢桿菌。本發(fā)明解決技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案是提供一種老窖梭狀芽孢桿菌Clostridium fermenticellae，該老窖梭狀芽孢桿菌可代謝產(chǎn)生短鏈脂肪酸和4?甲基苯酚。該老窖梭狀芽孢桿菌的保藏編號(hào)為CGMCC 17037，其在厭氧條件下發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)基成分不同，該菌株的主要代謝產(chǎn)物不同，當(dāng)培養(yǎng)基中添加乙酸鈉和乙醇時(shí)，以短鏈脂肪酸為主；添加L?酪氨酸時(shí)，以產(chǎn)4?甲基苯酚為主。該菌株在發(fā)酵產(chǎn)生短鏈脂肪酸等白酒風(fēng)味物質(zhì)，以及生產(chǎn)4?甲基苯酚等方面具有好的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于發(fā)酵微生物領(lǐng)域，具體涉及一株老窖梭狀芽孢桿菌以及使用該菌株發(fā)酵生產(chǎn)短鏈脂肪酸和4-甲基苯酚的用途。

背景技術(shù)

短鏈脂肪酸是白酒風(fēng)味物質(zhì)的重要組成成分，也是白酒中酯類風(fēng)味物質(zhì)形成的前體。濃香型白酒窖泥微生物中的一些梭菌(Clostridia)種類是產(chǎn)生短鏈脂肪酸的重要微生物。

另外，有些梭菌會(huì)代謝產(chǎn)生4-甲基苯酚，如梭狀芽孢桿菌屬(Clostridium)中某些種Clostridium difficile、Clostridium tyrobutyricum和Clostridium ultunense等。4-甲基苯酚是白酒中窖泥味的主要來(lái)源，也是一種重要的抗氧化劑，在醫(yī)藥，農(nóng)藥，塑料工業(yè)中等有著重要的應(yīng)用，但目前傳統(tǒng)的化工合成法其生產(chǎn)過(guò)程往往伴隨著大量的環(huán)境污染。目前還未見有既代謝產(chǎn)生短鏈脂肪酸，也能代謝產(chǎn)生4-甲基苯酚的梭狀芽孢桿菌的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是目前沒(méi)有既能生產(chǎn)短鏈脂肪酸，也能生產(chǎn)4-甲基苯酚的梭狀芽孢桿菌。本發(fā)明解決技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案是提供一種老窖梭狀芽孢桿菌Clostridium fermenticellae，該老窖梭狀芽孢桿菌可代謝產(chǎn)生短鏈脂肪酸和4-甲基苯酚。

其中，上述所述短鏈脂肪酸為乙酸、丁酸、戊酸或己酸中的至少一種。

其中，上述的老窖梭狀芽孢桿菌的保藏編號(hào)為CGMCC 17037。

其中，上述老窖梭狀芽孢桿菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO：l所示。

本發(fā)明提供了上述的老窖梭狀芽孢桿菌在制備短鏈脂肪酸和/或4-甲基苯酚中的用途。

本發(fā)明還提供了上述的老窖梭狀芽孢桿菌制備短鏈脂肪酸或4-甲基苯酚的方法。

該方法的步驟為將產(chǎn)4-甲基苯酚培養(yǎng)基或產(chǎn)短鏈脂肪酸培養(yǎng)基滅菌后，接種上述的老窖梭狀芽孢桿菌，在厭氧條件下發(fā)酵培養(yǎng)即得4-甲基苯酚或短鏈脂肪酸。

其中，上述方法中所述的厭氧條件為N₂﹕CO₂﹕H₂＝8～10﹕0～1﹕0～1。優(yōu)選的，所述的厭氧條件為N₂﹕CO₂﹕H₂＝8﹕1﹕1。

其中，上述方法中20～40℃靜置培養(yǎng)。優(yōu)選的，所述的培養(yǎng)條件為37℃。

其中，上述方法中所述的接種的菌株量為按體積比為2％～5％。優(yōu)選的，所述的接種的菌株量為按體積比為5％。

進(jìn)一步的，上述方法中所述的產(chǎn)4-甲基苯酚培養(yǎng)基的配方為葡萄糖2～5g/L，胰蛋白胨 5～10g/L，酵母粉1～5g/L，牛肉膏5～10g/L，氯化鈉1～5g/L，無(wú)水乙酸鈉1～5g/L，L-半胱氨酸鹽酸鹽0.5g/L，可溶性淀粉1～3g/L，F(xiàn)eCl₂·4H₂O 0～3g/L，CuCl₂·2H₂O 2.0mg/L， D(+)-生物素0～40mg/L，pH 4.5～8。