[發(fā)明專利]一種蒙椴種苗的組織培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910236138.4
• 申請(qǐng)日: 2019-03-27
• 公開（公告）號(hào): CN109863998B
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙泉?jiǎng)?/a>;鐵英;白玉娥;彭鵬;周曉煒;馮建芳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蒙樹生態(tài)建設(shè)集團(tuán)有限公司;內(nèi)蒙古和盛生態(tài)科技研究院有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京細(xì)軟智谷知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11471
• 代理人: 王睿

本發(fā)明提供了一種蒙椴種苗的組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：(1)取蒙椴種子進(jìn)行滅菌處理；(2)將滅菌后的蒙椴種子去除種皮，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到不定芽；(3)將所述不定芽接種于繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)，得到繼代苗；(4)將所述繼代苗接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到生根苗。在本發(fā)明的實(shí)施例中，增殖期以3.8倍速率增殖，生根率為86％。該方法可一次性培養(yǎng)大量的蒙椴再生苗，解決種子休眠和實(shí)生苗生長(zhǎng)緩慢的問題，避免了扦插方式而產(chǎn)生的病蟲害傳播。該方法可明顯提高蒙椴繁育系數(shù)，縮短了繁育周期。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及林木繁育技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蒙椴種苗的組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

蒙椴(Tilia mongolica)，為山地中生陽(yáng)性樹，在夏綠闊葉林的樺楊林或山地雜木林中為主要伴生樹種，局部地段可成為優(yōu)勢(shì)種，形成小片椴樹林。草原帶的山地也有散生。該樹種廣泛分布于蒙古以及中國(guó)大陸的山西、河北、遼寧、內(nèi)蒙古、河南等地，已由人工引種栽培。蒙椴木材輕軟，可作家具、炊具用材；花可入藥，種子榨油供工業(yè)用，樹皮纖維可制繩。蒙椴是理想的生態(tài)經(jīng)濟(jì)型樹種，對(duì)北方地區(qū)的水土保持及生態(tài)修復(fù)可以起到十分積極的作用。

蒙椴休眠性特別強(qiáng)，種子發(fā)芽率極低，且常規(guī)播種繁殖的苗木在幼年期生長(zhǎng)緩慢，株高1米的幼苗通常需生長(zhǎng)5～10年，導(dǎo)致育苗周期長(zhǎng)、繁殖系數(shù)低。扦插繁殖也不易生根，易積累病蟲害，而且對(duì)母樹的數(shù)量要求以及樹型的破壞性大，極大地制約了蒙椴的優(yōu)良種苗的推廣種植。

植物組織培養(yǎng)可以短時(shí)間內(nèi)大量生產(chǎn)苗木，且其生產(chǎn)不受時(shí)間、季節(jié)、環(huán)境等因素的影響。隨著技術(shù)的發(fā)展，組織培養(yǎng)的成本降低，繁殖數(shù)不斷增加，對(duì)蒙椴在市場(chǎng)上的推廣應(yīng)用及新品種的選育有很大的推動(dòng)作用。然而，目前沒有針對(duì)蒙椴種苗的相應(yīng)組織培養(yǎng)方法。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種蒙椴種苗的組織培養(yǎng)方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明涉及一種蒙椴種苗的組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

(1)取蒙椴種子進(jìn)行滅菌處理；

(2)將滅菌后的蒙椴種子去除種皮，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到不定芽；

(3)將所述不定芽接種于繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng)，得到繼代苗；

(4)將所述繼代苗接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到生根苗。

優(yōu)選地，步驟(1)中，滅菌前對(duì)所述蒙椴種子進(jìn)行以下操作：

[1]將蒙椴種子與細(xì)砂按1:3的重量比混合，揉搓至種子表面粗糙，將種子洗凈后浸泡2～4d；

[2]將浸泡后的種子濾干，加入濃硫酸浸泡2～4min后取出洗凈，并用水浸泡過夜，該步驟進(jìn)行兩次。

優(yōu)選地，步驟(1)中，所述滅菌處理為將所述種子依次使用酒精溶液和次氯酸鈉溶液浸泡后，然后用無(wú)菌水沖洗。

優(yōu)選地，步驟(1)中，所述酒精溶液的體積分?jǐn)?shù)為75％，所述次氯酸鈉溶液的質(zhì)量濃度為2％。

優(yōu)選地，步驟(2)中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以WPM培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，并添加2,4-D、GA₃、蔗糖和瓊脂得到，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中2,4-D的濃度為1.0mg/L，GA₃的濃度為1.0mg/L，蔗糖的濃度為30g/L，瓊脂的濃度為5.5g/L，且所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH值為5.8～6.0。

優(yōu)選地，步驟(2)中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)為將滅菌后的蒙椴種子剝除種皮后接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，在溫度為25±2℃下暗培養(yǎng)15～25天，直至種子萌發(fā)；待幼苗高度為3～5cm時(shí)改為弱光培養(yǎng)，待高度為7～10cm時(shí)得到不定芽。