[發明專利]基于一測多評法鑒別制何首烏的方法

有效

• 申請號: 201910232891.6
• 申請日: 2019-03-26
• 公開（公告）號: CN109900827B
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發明（設計）人: 羅定強;劉海靜;鄭隨軍;高亞梅;黃艷;王小鵬
• 申請（專利權）人: 陜西省食品藥品監督檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 徐文權

本發明公開了基于一測多評鑒別制何首烏的方法，經方法學驗證及省級檢驗機構復核，制何首烏樣品重現好，表明擬定的方法可行。首次提出的一測多評法經過四年時間的數據普查分析，從實驗室到飲片公司調研，從同一批生品加工炮制品，對傳統的制何首烏“九蒸九制”進行炮制時間的考察，得出的F值限度可行，以大黃素作為對照品，數據表明F值不大于0.6的為炮制完全的制何首烏，因為F值在0.6以下處于穩定的狀態；F值≥1.0的為生品特性，F值在0.6～1.0之間的炮制不完全的制何首烏樣品。本發明解決了制何首烏從外觀性狀上不能區分是否炮制完全的難題。同時一測多評法檢驗成分低，為大宗藥材制何首烏的安全使用提供了很好的支持。

技術領域

本發明屬于中藥鑒別技術領域，具體涉及一種基于一測多評法鑒別制何首烏的方法。

背景技術

何首烏為蓼科植物何首烏PolygonummultiflorumThunb.的干燥塊根，具有解毒、消癰、截瘧、潤腸通便的功效。制何首烏為何首烏的炮制品，制何首烏與何首烏功效完全不同：制何首烏作為大宗藥材，在中醫臨床廣泛使用，制何首烏具有補肝腎，益精血，烏須發，強筋骨，化濁降脂的功效；何首烏具有解毒，消癰，截瘧，潤腸通便的功效。

《本草匯言》記載“制非九次，勿寢其毒。非黑豆，勿殺其勢”。制何首烏的炮制方法參照《中國藥典》2010年版及《北京市中藥材炮制規范》，何首烏炮制品的毒性隨著炮制時間的增加而顯著降低。有相關課題組報道，在研究其購買的30批制何首烏中，實驗結果顯示有14批的毒性接近甚至高于生何首烏的對照藥材，提示這些炮制品未有效炮制減毒，可能增加臨床肝損傷的風險，嚴重威脅患者臨床用藥安全。然而，現行版藥典標準制何首烏與何首烏檢驗項目類似，不能區分制何首烏是否炮制完全。制何首烏肝毒性報道不斷增加：檢索中國知網，近5年文獻統計686例肝毒性不良反應。因此，炮制不完全的制何首烏從外觀性狀上不能判定制何首烏是否炮制完全，因而不同于正品與非正品的鑒定。

羅定強老師課題組在2015年承擔了何首烏與制何首烏的國評質量分析課題，通過實驗與比較文獻資料，發現何首烏在炮制過程中，隨著炮制時間的增加，苷類成分在下降，對應的苷元成分在增加。2016年，通過對何首烏生品、制何首烏數據普查分析，羅定強等在《中藥材》第39卷第10期“何首烏質量分析”論文中首次提出了“首烏規則”，即大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷、大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷的含量總和與大黃素、大黃素甲醚含量總和的比值F，大于等于1.0的為何首烏生品，反之為制何首烏。

按照上述規則進行判斷，當F值小于1.0時判斷應為制何首烏，但是，隨著該課題組近年來的進一步研究，發現F值小于1.0時并不能準確確定是否是炮制完全的制何首烏，炮制不完全的制何首烏的肝毒性仍然影響該藥品的廣泛應用。因此，現有的方法依然無法解決制何首烏的鑒別難題。

發明內容

為了克服上述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種基于一測多評法鑒別制何首烏的方法，能夠解決現有技術無法判斷制何首烏是否炮制完全的問題。

為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案予以實現：

本發明公開了一種基于一測多評法鑒別制何首烏的方法，包括以下步驟：

1)計算相對校正因子：精密量取大黃素、大黃素甲醚、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷，分別制備得到四種對照品溶液，然后采用外標法，得到四個對照品的標準曲線，以大黃素為內標，分別計算出大黃素甲醚、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷的相對校正因子；

2)計算各成分含量：取待檢測的制何首烏粉末制備供試品溶液，以大黃素作為對照品制備對照品溶液，采用高效液相色譜法進行梯度洗脫，獲得色譜圖，以大黃素對照品的峰面積為對照，然后按照步驟1)計算得到的對應成分的相對校正因子，計算得到大黃素甲醚、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷的含量；