[發(fā)明專利]基于一測多評(píng)法鑒別制何首烏的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910232891.6
• 申請日: 2019-03-26
• 公開（公告）號(hào): CN109900827B
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅定強(qiáng);劉海靜;鄭隨軍;高亞梅;黃艷;王小鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 徐文權(quán)

1.基于一測多評(píng)法鑒別制何首烏的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)計(jì)算相對校正因子：精密量取大黃素、大黃素甲醚、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷，分別制備得到四種對照品溶液，然后采用外標(biāo)法，得到四個(gè)對照品的標(biāo)準(zhǔn)曲線，以大黃素為內(nèi)標(biāo)，分別計(jì)算出大黃素甲醚、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷的相對校正因子；

2)計(jì)算各成分含量：取待檢測的制何首烏粉末制備供試品溶液，以大黃素作為對照品制備對照品溶液，采用高效液相色譜法進(jìn)行梯度洗脫，獲得色譜圖，以大黃素對照品的峰面積為對照，然后按照步驟1)計(jì)算得到的對應(yīng)成分的相對校正因子，計(jì)算得到大黃素甲醚、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷的含量；

3)計(jì)算F值判斷待檢測的制何首烏是否炮制完全，F(xiàn)值按式(1)計(jì)算：

F＝(大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷含量+大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷含量)/(大黃素含量+大黃素甲醚含量) (1)

則有：

當(dāng)F≤0.6時(shí)，判斷待檢測的制何首烏為炮制完全的制何首烏；

當(dāng)F≥1.0，判斷待檢測的制何首烏為何首烏生品；

當(dāng)0.6＜F＜1，判斷待檢測的制何首烏為炮制不完全的制何首烏。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于一測多評(píng)法鑒別制何首烏的方法，其特征在于，F(xiàn)值的變化與炮制加工時(shí)間相關(guān)，何首烏生品炮制時(shí)間≥8h，F(xiàn)值≤0.6。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于一測多評(píng)法鑒別制何首烏的方法，其特征在于，高效液相色譜條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.1％磷酸水溶液為流動(dòng)相B，檢測波長為254nm。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于一測多評(píng)法鑒別制何首烏的方法，其特征在于，采用高效液相色譜梯度洗脫時(shí)，流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的變化比例如下：

0～8min，流動(dòng)相A：18％～30％、流動(dòng)相B：70％～82％；

8～24min，流動(dòng)相A：30％～36％、流動(dòng)相B：64％～70％；

24～28min，流動(dòng)相A：36％～80％、流動(dòng)相B：20％～64％；

28～39min，流動(dòng)相A：80％～95％、流動(dòng)相B：5％～20％；

39～40min，流動(dòng)相A：18％～95％、流動(dòng)相B：5％～82％；

40～45min，流動(dòng)相A：18％、流動(dòng)相B：82％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于一測多評(píng)法鑒別制何首烏的方法，其特征在于，步驟1)所述相對校正因子計(jì)算方法為：以大黃素作為內(nèi)標(biāo)物，按下式(2)計(jì)算大黃素甲醚、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的相對校正因子f_km；

其中，A_k為大黃素峰面積；W_k為大黃素濃度；A_m為其他待測組分的峰面積；W_m為其他待測組份的濃度；k為大黃素，m為其他待測組分，f_k為大黃素的校正因子，f_m為其他待測組分的校正因子。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的基于一測多評(píng)法鑒別制何首烏的方法，其特征在于，大黃素、大黃素甲醚、大黃素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黃素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷的相對保留時(shí)間及相對校正因子如下：

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于一測多評(píng)法鑒別制何首烏的方法，其特征在于，步驟2)中，供試品溶液是向1g待檢測的制何首烏粉末加入50mL甲醇，加熱回流處理1h，冷卻制得。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于一測多評(píng)法鑒別制何首烏的方法，其特征在于，步驟2)中，對照品溶液是將大黃素溶于甲醇中制成濃度為30μg/ml的溶液。