[發(fā)明專利]基于堿性藍(lán)-3的檢測次氯酸的近紅外熒光探針分子的制備

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910228308.4
• 申請日: 2019-03-25
• 公開（公告）號: CN109928940B
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 呂光磊;鄭武斌;楊佳佳;沈揚(yáng);李春霞
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江師范大學(xué)
• 主分類號: C07D265/38
• 分類號: C07D265/38;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 王守仁

本發(fā)明涉及基于堿性藍(lán)?3的檢測次氯酸的近紅外熒光探針分子的制備。該近紅外熒光探針分子是基于堿性藍(lán)?3的衍生物作為次氯酸響應(yīng)的熒光探針分子，具有響應(yīng)時間短、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，從而為檢測某些病變組織中微量的次氯酸提供了可能。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：合成的探針分子具有迅速的次氯酸響應(yīng)、良好的特異性和較低的檢測限，為實現(xiàn)病變組織中微量次氯酸提供了可能；通過調(diào)整苯胺對位官能團(tuán)的取代基可以設(shè)計合成一系類對次氯酸響應(yīng)的探針分子。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基于堿性藍(lán)-3(BB-3)類化合物作為次氯酸響應(yīng)的熒光探針分子，該類探針分子具有響應(yīng)時間短、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，從而為檢測某些病變組織中微量的次氯酸提供了可能。

背景技術(shù)

活性氧(ROS)是需氧細(xì)胞在代謝過程中產(chǎn)生一系列活性氧，包括：O^2-、H₂O₂及HClO等。次氯酸是最重要的ROS之一，它是由過氧化氫和氯離子在髓過氧化物酶(MPO)催化作用下產(chǎn)生，在生物體內(nèi)擔(dān)當(dāng)維持氧化還原平衡和抵御病原體等角色。但是，過度表達(dá)的次氯酸就會引起氧化應(yīng)激，從而造成各種疾病，包括心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、動脈粥樣硬化等。因此，開發(fā)一種可靠、精準(zhǔn)以及能夠在生理水平條件下檢測次氯酸的分析方法是至關(guān)重要的。目前為止，檢測次氯酸的主要方法有：比色法、電位分析法、化學(xué)發(fā)光法、庫侖滴定法和熒光分析法等。在眾多的分析方法之中，熒光分析法以其操作簡便、響應(yīng)迅速和高靈敏度被廣泛應(yīng)用于生物組織中的次氯酸檢測。但是，目前所報道的次氯酸檢測探針具有靈敏度低、響應(yīng)速度慢以及合成復(fù)雜等缺點(diǎn)。近些年有一些有機(jī)小分子熒光探針被用于次氯酸檢測，按發(fā)光母核的不同大致可以分為：豆香素、BODIPY、花青染料等，但以堿性藍(lán)-3(BB-3)為原料合成的近紅外次氯酸檢測探針并未有相關(guān)報道。為了進(jìn)一步探索HClO的致病機(jī)理，需開發(fā)一種基于堿性藍(lán)-3的制備簡單、響應(yīng)迅速、高特異性以及能夠?qū)崿F(xiàn)實時監(jiān)測的次氯酸熒光探針分子的制備方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：提供一種制備簡單、響應(yīng)迅速、高特異性的HClO響應(yīng)熒光探針。該類探針為檢測病變組織部位的次氯酸，探索次氯酸與其關(guān)聯(lián)疾病之間的相關(guān)性提供了可能。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題采用以下的技術(shù)方案：

本發(fā)明提供的近紅外熒光探針分子，是一種基于堿性藍(lán)-3的檢測次氯酸的近紅外熒光探針分子，其結(jié)構(gòu)式為：

上述結(jié)構(gòu)式中：X為不同的吸電子基團(tuán)和供電子基、氫原子，烷基或環(huán)烷基，取代的烷基或環(huán)烷基。

所述的近紅外熒光探針分子，可以采用6個碳以下的烷基或環(huán)烷基，這樣可以驗證不同烷基取代次氯酸探針的相關(guān)性質(zhì)。

所述的近紅外熒光探針分子，用于制備響應(yīng)迅速、非侵入式的特異性檢測次氯酸探針，特別是用于特異性檢測次氯酸。

本發(fā)明提供的近紅外熒光探針分子的制備方法，采用以下合成路線方法制備上述基于堿性藍(lán)-3的檢測次氯酸的熒光探針分子：

上述合成路線中：BB-3是堿性藍(lán)-3，BC是堿性藍(lán)-3酰氯化后的產(chǎn)物，2是對位不同取代基苯胺，BC-X是方案實施后得到的一系類目標(biāo)熒光探針分子，triphosgene是三光氣。

上述制備方法，其制備過程是：

(1)制備化合物BC：

稱取化合物BB-3和Na₂CO₃溶解到水和二氯甲烷的混合溶液中，將保險粉溶于水中緩慢注入反應(yīng)體系，N₂保護(hù)40℃反應(yīng)1h；在干燥的三口瓶內(nèi)加入Na₂CO₃，然后將上述反應(yīng)液移入到三口瓶中，緩慢滴加三光氣的二氯甲烷溶液，在氮?dú)夥諊卤３?0℃反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用二氯甲烷-水的體系進(jìn)行萃取，濾液用無水硫酸鈉干燥，柱層析分離；