[發明專利]一種去除豬血清對傳代細胞生長毒性的方法在審
| 申請號： | 201910227595.7 | 申請日： | 2019-03-25 |
| 公開（公告）號： | CN109971698A | 公開（公告）日： | 2019-07-05 |
| 發明（設計）人： | 胡井雷;劉景利;徐姍姍;張廣柱;馬蘭;楊丹;楊帆;魏興 | 申請（專利權）人： | 哈爾濱維科生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/00 | 分類號： | C12N5/00 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 鄧宇 |
| 地址： | 150036 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 豬血清 傳代細胞 去除 吸附 滅菌 生長 細胞培養 細胞培養技術 豬流行性腹瀉 活性炭 離心處理 培養細胞 實驗研究 無菌容器 無菌條件 細胞毒性 抗血清 單層 可用 豬血 密封 | ||
1.一種去除豬血清對傳代細胞生長毒性的方法，其特征在于，包括如下步驟：
1)將豬血在無菌條件下進行離心處理，離心后收取豬血清；
2)將步驟1)中獲得的豬血清用無菌容器密封后滅能；
3)滅能后豬血清用已滅菌的活性炭進行吸附，吸附后收集豬血清；
4)吸附后的豬血清經過濾滅菌后加入到長滿單層的傳代細胞中，繼續培養細胞。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述豬血為豬流行性腹瀉抗血清的豬血。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述離心處理，條件為5000g/分鐘，離心時間為10分鐘。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)所述滅能，條件為56℃滅能30分鐘。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)所述吸附，是指將滅能后豬血清用已滅菌活性炭按1:1體積比混合后于4℃吸附24小時，24小時后按1:1體積比重新更換活性炭再次吸附24小時。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)所述活性炭為果殼活性炭。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，步驟3)所述活性炭在0.02N12/KL水溶液中吸附的碘的量大于600，比表面積大于850m2/g。
8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)所述過濾是指將吸附后的豬血清經無菌0.22μm濾器進行過濾。
9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)所述經過濾滅菌后的豬血清在培養傳代細胞時的用量，以96孔培養板計，每孔加入100μL。
10.根據權利要求1-9任意一項所述的方法，其特征在于，所述細胞包括ST細胞、Vero細胞和Marc-145細胞。
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