[發(fā)明專利]鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀的分子標(biāo)記與方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910227211.1
• 申請日: 2019-03-25
• 公開（公告）號: CN109797242B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛新國;景蕊蓮;張宏娟
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11;C12Q1/6858
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 魏少偉

本發(fā)明公開了鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀的分子標(biāo)記與方法。本發(fā)明公開的鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀的分子標(biāo)記為小麥基因組中的H和J位點(diǎn)，H位點(diǎn)為序列表序列1自5′末端的第31位，J位點(diǎn)為序列表序列2自5′末端的第21位，H位點(diǎn)為T的小麥穗長長于或候選長于H位點(diǎn)為G的小麥穗長；J位點(diǎn)為C的小麥每穗小穗數(shù)多于或候選多于J位點(diǎn)為T的小麥每穗小穗數(shù)。通過檢測H和J位點(diǎn)的核苷酸，即可找到穗長和每穗小穗數(shù)相對較高的小麥。本發(fā)明為小麥分子標(biāo)記輔助選擇育種提供了一個(gè)新方法，在培育高產(chǎn)小麥品種或研究中具有重要意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域中，鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀的分子標(biāo)記與方法。

背景技術(shù)

小麥?zhǔn)鞘澜绲闹饕Z食作物。隨著全球氣候變化，各種極端天氣頻發(fā)，嚴(yán)重影響了小麥生產(chǎn)。為確保糧食安全，迫切需要培育抗逆、穩(wěn)產(chǎn)、廣適的小麥新品種，挖掘和利用小麥自身優(yōu)異遺傳資源是解決這一問題的有效途徑。NAC(NAM，ATAF和CUC)轉(zhuǎn)錄因子是植物特有的一種轉(zhuǎn)錄因子，它不僅在植物生長發(fā)育過程中起重要作用，而且還參與對高鹽、低溫、低氧和干旱等多種非生物脅迫的響應(yīng)。如何將NAC用于抗逆高產(chǎn)農(nóng)作物新品種培育，不僅是分子生物學(xué)家和遺傳學(xué)家關(guān)注的焦點(diǎn)，也是育種家迫切要解決的問題。從農(nóng)作物種質(zhì)資源中發(fā)掘NAC優(yōu)異等位基因，然后通過傳統(tǒng)雜交和分子標(biāo)記輔助選擇相結(jié)合加以利用，無疑是最直接、最有效，也是最易被接受的農(nóng)作物品種改良方法。常規(guī)育種通常依賴表型選擇，盡管取得很大成就，但耗時(shí)耗力，進(jìn)展緩慢；相比較而言，分子標(biāo)記輔助選擇育種可以在早世代進(jìn)行有針對性的選擇，操作簡單易行，且可以高效利用優(yōu)異基因，能顯著加快育種進(jìn)程。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是如何檢測小麥的產(chǎn)量相關(guān)性狀—穗長和每穗小穗數(shù)。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先提供了一種鑒定或輔助鑒定小麥產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法，所述產(chǎn)量相關(guān)性狀為穗長和每穗小穗數(shù)，所述方法包括：檢測待測小麥H和J位點(diǎn)的核苷酸，根據(jù)H和J位點(diǎn)的核苷酸確定待測小麥性狀：

H位點(diǎn)為T的小麥穗長長于或候選長于H位點(diǎn)為G的小麥穗長；J位點(diǎn)為C的小麥每穗小穗數(shù)多于或候選多于J位點(diǎn)為T的小麥每穗小穗數(shù)；

所述H位點(diǎn)為序列表序列1自5′末端的第31位；

所述J位點(diǎn)為序列表序列2自5′末端的第21位。

所述待測小麥可為大于等于兩種小麥組成的小麥群體。

上述方法中，所述檢測待測小麥H和J位點(diǎn)的核苷酸可包括1)和2)：

1)利用名稱為PH的引物對對待測小麥的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，檢測PCR擴(kuò)增產(chǎn)物對應(yīng)于序列表中序列1的第31位的核苷酸，確定所述H位點(diǎn)的核苷酸；所述PH能擴(kuò)增得到含有所述H位點(diǎn)的DNA片段；

2)利用名稱為PJ的引物對對待測小麥的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，檢測PCR擴(kuò)增產(chǎn)物對應(yīng)于序列表中序列2的第21位的核苷酸，確定所述J位點(diǎn)的核苷酸；所述PJ能擴(kuò)增得到含有所述J位點(diǎn)的DNA片段。

利用名稱為PH的引物對對待測小麥的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，可先利用名稱為NAC67Ds的引物對對所述待測小麥的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到NAC67Ds PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，然后再利用所述PH對所述NAC67Ds PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增；所述NAC67Ds PCR擴(kuò)增產(chǎn)物含有H和J位點(diǎn)。

利用名稱為PJ的引物對對待測小麥的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，可利用所述PH對所述NAC67Ds PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

所述NAC67Ds由NAC67DsF和NAC67DsR組成，所述NAC67DsF和所述NAC67DsR分別為序列表中序列7和8所示的單鏈DNA。

上述方法中，所述PH由名稱分別為pe1和pe2的單鏈DNA組成，所述pe1的序列可為序列表中序列3，所述pe2的序列可為序列表中序列4；