[發明專利]一種荷仙菇多糖提取工藝參數優化方法及提取方法

在審

• 申請號: 201910219607.1
• 申請日: 2019-03-22
• 公開（公告）號: CN109957039A
• 公開（公告）日: 2019-07-02
• 發明（設計）人: 賀音;程野;耿廣軍;曹向宇;蔡天革;陳麗娜;張慧嬌
• 申請（專利權）人: 遼寧大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 沈陽杰克知識產權代理有限公司 21207
• 代理人: 鄭賢明

1.一種基于響應面法優化荷仙菇多糖提取工藝參數優化方法，其特征包括以下步驟：

S1：采集荷仙菇原料，干燥，粉碎，荷仙菇粉末備用；

S2：用超聲波輔助酶法提取荷仙菇中的多糖，測定提取液中多糖的含量；

S3：選擇超聲時間、pH、酶活力、酶解溫度、酶解時間和液料比進行單因素試驗；

S4：在單因素試驗的基礎上，選取影響最大的三個因素，以酶活力、pH和超聲時間為自變量，以多糖的提取率為響應值，建立多元二次方程；

S5：對多元二次方程進行響應面分析，取多糖提取率為最大值，對荷仙菇多糖的提取工藝進行優化，得到提取工藝參數。

2.根據權利要求1所述的一種基于響應面優化荷仙菇多糖提取工藝參數優化方法，其特征在于，所述的步驟S5后，進行以下步驟：

S6：利用S5中得到的提取工藝參數再進行荷仙菇多糖最佳提取參數的確定和實驗驗證。

3.根據權利要求1所述的一種基于響應面優化荷仙菇多糖提取工藝參數優化方法，其特征在于：所述的S2中測定提取液中多糖含量的具體方法為按照苯酚-硫酸法，再根據線性回歸方程換算成樣品中的多糖含量，其荷仙菇多糖的提取率計算公式如下：

式中：

C：根據標準曲線得到的稀釋后的樣品濃度mg/mL；

K：稀釋倍數；

V：提取液體積mL；

m：樣品質量g。

4.根據權利要求1所述的一種基于響應面優化荷仙菇多糖提取工藝參數優化方法，其特征在于：所述的S3中進行單因素試驗時，分析各因素對多糖提取率的影響，選取超聲時間、pH、酶活力、酶解溫度、酶解時間和液料比依次進行單因素試驗，其中超聲時間為：10、20、30、40、50min；pH為：3.5、4.0、4.5、5.0、5.5；酶活力為：60、120、180、240、300U/g；酶解溫度為：30、40、50、60、70℃；酶解時間為：1、1.5、2、2.5、3h；液料比為：20、30、40、50、60mL/g。

5.根據權利要求1所述的一種基于響應面優化荷仙菇多糖提取工藝參數優化方法，其特征在于：所述的S4中建立多元二次方程時，選擇對提取率影響大的三個因素，酶活力、pH和超聲時間，根據實驗數據進行多元回歸擬合，獲得荷仙菇中多糖提取率對自變量三個因素，酶活力、pH和超聲時間的二次多項方程，根據實驗結果建立數學模型，建立數學模型后，對荷仙菇中多糖提取的數學模型進行顯著性差異檢驗。

6.根據權利要求1所述的一種基于響應面優化荷仙菇多糖提取工藝參數優化方法，其特征在于：在S5中，選取最佳工藝參數時，在選取的三個因素范圍內，多糖提取率選最大，根據回歸模型，通過軟件分析得出荷仙菇多糖最佳提取工藝參數。

7.一種權利要求1-6提取工藝參數優化方法中所應用的荷仙菇多糖提取方法，其特征在于，其步驟為：

1)：確定提取過程中所需的超聲時間、pH、酶活力、酶解溫度、酶解時間和液料比；

2)：采集荷仙菇原料，干燥，粉碎，荷仙菇粉末備用；

3)：將S2中得到的黃荷仙菇粉末加入水中，并采用超聲輔助酶法提取荷仙菇多糖，得到提取液，該步中超聲時間、pH、酶活力、酶解溫度、酶解時間和液料比為S1中的確認值。

8.根據權利要求7所述的一種荷仙菇多糖提取方法，其特征在于：所述的步驟1)中，超聲時間為10～50min；pH為3.5～5.5；酶活力為60～300U/g；酶解溫度為30～70℃；酶解時間為1～3h；液料比為20～60mL/g。

9.根據權利要求8所述的一種荷仙菇多糖提取方法，其特征在于：所述超聲時間為21min；pH為4.9；酶活力為185U/g；酶解溫度為60℃；酶解時間為2h；液料比為50mL/g。