[發明專利]分離免疫細胞的方法及其應用有效
| 申請號: | 201910216336.4 | 申請日: | 2019-03-21 |
| 公開(公告)號: | CN109897817B | 公開(公告)日: | 2019-12-13 |
| 發明(設計)人: | 徐智峰;張新 | 申請(專利權)人: | 廣州沙艾生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/071 | 分類號: | C12N5/071 |
| 代理公司: | 11582 北京久維律師事務所 | 代理人: | 邢江峰 |
| 地址: | 510000 廣東省廣州市國際*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 免疫細胞 諸葛菜 單個核細胞層 未貼壁細胞 計數結果 胎牛血清 添加試劑 誘導分化 壁細胞 離心管 培養孔 外周血 對貼 應用 | ||
1.一種分離免疫細胞并誘導分化成EPCs的方法,其包括:
培養過程中應用了諸葛菜素D。
2.權利要求1所述的方法,其步驟如下:
(1)獲取單個核細胞;
(2)24孔板的培養板中接種細胞懸液置37℃、體積分數為5%的CO2培養箱中培養2小時,2小時后,用培養液洗滌去除未貼壁細胞;
(3)使用含10%胎牛血清的RPMI1640培養液,添加M-CSF、IL-3、諸葛菜素D,每2天添加試劑1次,對貼壁細胞進行初步培養8天。
3.權利要求2所述的方法,其特征在于:
步驟(3)中,各培養孔最終體積為1ml,M-CSF、IL-3、諸葛菜素D的終濃度分別為5ng/ml、0.4ng/ml、0.1-0.3ng/ml。
4.權利要求3所述的方法,其特征在于:
繼續傳代培養10天。
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