[發明專利]B7-H3抗原結合結構域的分離的結合蛋白、核酸、載體、CAR-T細胞及其應用

有效

• 申請號: 201910210679.X
• 申請日: 2019-03-20
• 公開（公告）號: CN109912718B
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發明（設計）人: 陳模江;王剛;劉金超
• 申請（專利權）人: 北京善科生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12N5/10;C12N15/867;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 曹桓

1.包含B7-H3抗原結合結構域的分離的結合蛋白，其特征在于，其輕鏈可變區和重鏈可變區的氨基酸序列依次如SEQ ID NO.1-2所示的氨基酸序列。

2.根據權利要求1所述的結合蛋白，其特征在于，所述結合蛋白為scFv。

3.根據權利要求1所述的結合蛋白，其特征在于，所述輕鏈可變區與所述重鏈可變區通過連接區連接，所述連接區的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

4.一種分離的核酸，其特征在于，所述核酸編碼權利要求1-3任一項所述的結合蛋白。

5.根據權利要求4所述的核酸，其特征在于，所述輕鏈可變區的核酸序列如SEQ IDNO.4所示。

6.根據權利要求4所述的核酸，其特征在于，所述重鏈可變區的核酸序列如SEQ IDNO.5所示。

7.根據權利要求4所述的核酸，其特征在于，所述連接區的核酸序列如SEQ ID NO.6所示。

8.根據權利要求4所述的核酸，其特征在于，所述核酸還連接有信號肽核酸序列。

9.根據權利要求8所述的核酸，其特征在于，所述信號肽的核酸序列如SEQ ID NO.7所示。

10.根據權利要求8所述的核酸，其特征在于，所述信號肽位于所述輕鏈可變區的氮端。

11.一種載體，其特征在于，其包含權利要求4-10任一項所述的核酸。

12.根據權利要求11所述的載體，其特征在于，所述載體含有CD8α的鉸鏈區、CD8α的跨膜結構域以及CD3ζ的細胞內結構域，并包含CD28或4-1BB共刺激結構域；所述載體的核酸序列依次為信號肽-VL-Linker-VH-CD8ɑ-CD28-CD3ζ或信號肽-VL-Linker-VH-CD8ɑ-4-1BB-CD3ζ。

13.根據權利要求12所述的載體，其特征在于，CD8α的鉸鏈區、CD8α的跨膜結構域的核酸序列如SEQ ID NO.9所示。

14.根據權利要求12所述的載體，其特征在于，CD3ζ的細胞內結構域的核酸序列如SEQID NO.11所示。

15.根據權利要求12所述的載體，其特征在于，CD28的核酸序列如SEQ ID NO.13所示。

16.根據權利要求12所述的載體，其特征在于，4-1BB的核酸序列如SEQ ID NO.15所示。

17.根據權利要求11-16任一項所述的載體，其特征在于，所述載體為慢病毒載體。

18.根據權利要求17所述的載體，其特征在于，所述慢病毒載體為pCDH-CMV-CAR-28或pCDH-CMV-CAR-BB。

19.根據權利要求18所述的載體，其特征在于，所述載體中各核酸序列的連接方式如下：

pCDH-CMV-B7-H3-CAR-28或pCDH-CMV-B7-H3-CAR-BB；

其中，B7-H3-CAR-28的核酸序列依次為信號肽-VL-Linker-VH-CD8ɑ-CD28-CD3ζ；

B7-H3-CAR-BB的核酸序列依次為信號肽-VL-Linker-VH-CD8ɑ-4-1BB-CD3ζ。