[發(fā)明專利]一種豬胰脂肪酶固定化的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201910206823.2 | 申請(qǐng)日： | 2019-03-19 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN109735530A | 公開（公告）日： | 2019-05-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 詹世平;王景昌;商雪航;侯維敏 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 大連大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N11/14 | 分類號(hào)： | C12N11/14 |
| 代理公司： | 大連八方知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 21226 | 代理人： | 衛(wèi)茂才 |
| 地址： | 116622 遼*** | 國(guó)省代碼： | 遼寧;21 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說(shuō)明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 制備 固定化 豬胰脂肪酶 固定化酶 胰脂肪酶 種豬 生物醫(yī)用高分子材料 氨基化二氧化硅 綠色催化劑 催化活性 高效環(huán)保 共價(jià)結(jié)合 應(yīng)用 | ||
1.一種豬胰脂肪酶固定化的方法，其特征在于，所述方法采用氨基化二氧化硅顆粒為載體，豬胰脂肪酶（IPPL）為固定化對(duì)象，豬胰脂肪酶與載體之間是依靠共價(jià)結(jié)合的方式相互連接的。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種豬胰脂肪酶固定化的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
（1）將氨基化二氧化硅顆粒加入到0.1mol/L、pH=7~9的磷酸緩沖鹽溶液(PBS)中，超聲，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加入戊二醛，戊二醛在上述PBS溶液中的體積濃度為0.5~2.5%，攪拌，離心棄去上清液，用0.01 mol/L PBS溶液清洗顆粒，即得載體溶液；
（2）在載體溶液中，加入4 mg/mL的豬胰脂肪酶（IPPL）溶液，恒溫反應(yīng)；其中IPPL溶液與0.1mol/L PBS溶液的體積比為10:1~4；
（3）反應(yīng)結(jié)束后，離心棄去上清液，加入甘氨酸封閉，離心洗滌，用0.01 mol/L PBS（含0.001 mol/L的EDTA和0.008 mol/L的半胱氨酸）清洗顆粒并恒溫干燥，得氨基化二氧化硅固定化酶顆粒。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種豬胰脂肪酶（IPPL）固定化的方法，其特征在于，步驟（1）中PBS溶液的pH為7.5，戊二醛在上述PBS溶液中的體積濃度為2.0 %；步驟（2）中IPPL溶液與0.1mol/L PBS溶液的體積比為10:2，反應(yīng)溫度40℃，反應(yīng)時(shí)間8h。
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