[發明專利]一種甜瓜育種材料目標性狀高效純合方法

在審

• 申請號: 201910205728.0
• 申請日: 2019-03-19
• 公開（公告）號: CN109722489A
• 公開（公告）日: 2019-05-07
• 發明（設計）人: 汪承剛;侯金鋒;朱世東;袁凌云;陳國戶;蘇亞;李仁杰;王安源
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;A01H1/04;A01H1/02
• 代理公司: 合肥廣源知識產權代理事務所(普通合伙) 34129
• 代理人: 徐國法

本發明公開了一種甜瓜育種材料目標性狀高效純合方法，包括如下步驟：（1）種質收集及DNA提取；（2）PCR擴增；（3）電泳；（4）銀染；（5）數據分析；（6）雜合后代F1的獲取；（7）純合后代的選擇。本發明應用RAPD、ISSR、SSR的DNA分子標記對甜瓜群體進行掃描，并結合甜瓜的表性數據，在分子層面上對群體進行結構劃分、發掘與目標性狀緊密連鎖的分子標記，通過雜交技術手段，可以快速純合甜瓜的目標性狀，為甜瓜優良品種的選育奠定了很好的基礎，極具市場推廣應用價值。

技術領域

本發明屬于品種選育技術領域，具體涉及一種甜瓜育種材料目標性狀高效純合方法。

背景技術

甜瓜屬于葫蘆科甜瓜屬草本植物。甜瓜果實味美甘甜，營養豐富，在我國栽培面積廣泛。甜瓜品種選育過程中，如何創制、篩選出穩定純合的家系材料，是影響雜交育種進程的關鍵。進行甜瓜種質材料創制時，會得到一些雜合后代，將這些雜合后代進行目標性狀的純合，需要進行多代自交，通過觀察自交后代家系的田間表型是否表現一致，來確定性狀是否純合，工作量大、周期長。

DNA分子標記是以DNA的多態性為基礎的遺傳標記，能夠穩定遺傳，且遺傳方式簡單。近年來己有一些分子標記技術建立，并迅速廣泛的應用于作物遺傳育種領域。通過應用RAPD、SSR等DNA分子標記對群體進行掃描，可以進一步在分子層面上對群體進行結構劃分、發掘與目標性狀緊密連鎖的分子標記。

發明內容

本發明的目的是針對現有的問題，提供了一種甜瓜育種材料目標性狀高效純合方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種甜瓜育種材料目標性狀高效純合方法，包括如下步驟：

（1）種質收集及DNA提取：

收集甜瓜種質材料，將收集的甜瓜種質材料進行播種，發芽成苗后，取樣進行DNA提取，備用；

（2）PCR擴增：

根據前人研究結果選取RAPD、ISSR、SSR標記引物，將具有多態性的標記引物對步驟（1）中提取的DNA進行PCR擴增，得擴增產物備用；

（3）電泳：

將步驟（2）中所得的擴增產物進行凝膠電泳；

（4）銀染：

將步驟（3）中電泳結束后的凝膠進行銀染，顯色，備用；

（5）數據分析：

a. 根據步驟（4）中顯色的PCR產物電泳條帶位置，進行多態性分析，得到分子數據備用；

b. 應用操作a中所得的分子數據，由structure軟件進行群體結構分析，得到群體結構數據備用；

c. 田間鑒定記錄甜瓜種質資源的表型，得到表型數據備用；

d. 應用操作a中所得的分子數據、操作b中所得的群體結構數據、操作c中所得的表型數據進行關聯，從而鑒定與各個性狀緊密連鎖的分子標記，并進一步分析挖掘特異等位變異；

（6）雜合后代F1的獲取：

根據育種目標，結合甜瓜種植資源表型數據，選擇帶有目標性狀的材料，進行雜交或自交，獲得雜合后代F1；

（7）純合后代的選擇：

a. 將步驟（6）中所得的雜合后代F1進行自交獲得F2代種子，F2代種子進行溫室育苗，2周后，采樣提取DNA，以F2代幼苗的DNA為模板，以步驟（5）操作d中獲得的目標性狀關聯的分子標記引物，進行PCR擴增及凝膠電泳分析；