[發明專利]ATP生物熒光lgCB-lgIB標曲法檢測抗菌陶瓷抗細菌性能的方法

在審

• 申請號: 201910199712.3
• 申請日: 2019-03-15
• 公開（公告）號: CN110272942A
• 公開（公告）日: 2019-09-24
• 發明（設計）人: 李文杰;郝凌云;劉曉慧;郭鳳柳;崔宗巖
• 申請（專利權）人: 李文杰
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12Q1/06;C12N1/20;C12R1/42;C12R1/19;C12R1/445;C12R1/01
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本發明涉及一種抗菌陶瓷抗細菌性能的檢測方法，檢測步驟包括：樣品制備及前處理；設備選型及試劑、培養基配制；菌種保藏、活化及菌懸液制備；OD值?活菌含量對數值lgC_B標曲建立及接種菌液C_B標定；lgC_B?相對熒光強度對數值lgI_B標曲建立；樣品接種、培養及洗脫回收；回收液I_B測定及其活菌含量C_B和T_B推算；抗菌率R或抗菌活性值A計算；結果評價；其特別之處在于：應用ATP熒光光度計對以R或A表征的陶瓷抗細菌性能進行精準定量測試。本發明規定洗脫回收接觸0h及培養24h后對照樣品和抗菌樣品，測定回收液I_B并以lgI_B表征和計算R或A；提供結果評價依據。本發明研發的陶瓷抗細菌性能檢測的ATP生物熒光lgC_B?lgI_B標曲法，將以先進檢測技術支撐產品質量提升和市場秩序規范。

技術領域

本發明涉及抗菌陶瓷的抗細菌性能測試方法，具體是一種應用ATP熒光光度計對以抗菌率R或抗菌活性值A表征的抗菌陶瓷抗細菌性能進行精準定量檢測的ATP生物熒光lgC_B-lgI_B標準曲線法，屬于陶瓷抗菌功能檢測技術領域。

背景技術

中國陶瓷生產歷史悠久，陶瓷年產量約占世界總產量的90％，年出口量逾40億件；其中日用陶瓷、建筑陶瓷、衛生陶瓷分別占據世界總產量的65％、60％和40％，但陶瓷總產值卻僅為世界總產值的10％，產品科技含量低導致的同質化競爭愈演愈烈。近年來，采用新型抗菌技術改造傳統陶瓷生產工藝已成為國內優勢陶企轉型發展的主攻方向，抗菌技術在陶瓷產業的應用和普及勢不可擋，抗菌功能成為陶瓷產品極具特色的一個“賣點”；但現有檢測技術的滯后卻嚴重制約著產業發展。

目前，國內外抗菌材料性能檢測技術體系主要針對細菌和真菌，各國抗細菌性能測試方法原理多基于對細菌進行分離培養的平板計數法，一是日本工業標準提出的貼膜培養和浸漬定量試驗方法；二是源自美國紡織業的抑菌環法；三是國際通用的振蕩燒瓶法；四是源于美國紡織企業的滴下法；五是日本企業針對光催化型抗菌制品研發的蓋玻片法。截至目前，我國在借鑒國外相關方法的基礎上先后制定JC/T 897-2002(2014年修訂)《抗菌陶瓷制品抗細菌性能》和GB/T28116-2011《抗菌骨質瓷》。但現有抗細菌性能檢測方法在技術內容和實際應用中存在以下共性問題：一是所涉實驗菌種過少，難以滿足企業與時俱進的新品研發與質控需求；二是實驗過程繁瑣，相關操作受實驗員專業經驗影響，測試誤差大，缺乏可比性；三是測試周期在48小時～72小時之間，時間及經濟成本高。近年來，在國際細菌檢測技術領域ATP熒光分析法發展日益成熟，與傳統平皿法相比ATP檢測結果的相關性為98％，準確度高且可實現快速檢測；發達國家已將此方法運用于HACCP中。國內ATP相關研究起步較晚，受應用需求牽引，現ATP熒光檢測儀已成為中國衛生部門指定的衛生監督和食品安全相關的專用檢測設備。當前國外抗菌材料性能檢測技術研究向定量化、快速化和簡易化趨勢發展，注重檢測結果準確性和可比性；已借鑒ATP熒光分析原理制定ISO20743:2007-2013《Textiles-Determination of antibacterial activity of textile products(紡織品-抗菌整理紡織品的抗細菌性能測定)》和ISO13629-1:2012《Textiles-Determinationof antifungal activity of textile products.Part1Luminescence(紡織品-抗菌整理紡織品的防霉性能測定)》，規定了以樣品接種后ATP含量變化表征抗細/霉菌性能的熒光測定法，但其僅適用于具有吸水性且對照樣細/霉菌增長值＞0的紡織材料或微孔材料，在活菌回收方式、試驗有效條件等關鍵技術方面不適用于具有非吸水性硬質表面且對照樣細菌增長值＜0的陶瓷、玻璃等無機非金屬材料等；同時未提供明確的結果計算公式和測量不確定度評估。另外，該標準方法相關抗菌性能表征參數相對單一，僅涉及抗菌活性值A，而我國則慣用抗菌率R。