[發明專利]一種紅樹內生真菌中混元萜類化合物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201910197121.2
• 申請日: 2019-03-15
• 公開（公告）號: CN109824689B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 鄭彩娟;黃國雷;白猛;陳光英;王斌
• 申請（專利權）人: 海南師范大學
• 主分類號: C07D493/22
• 分類號: C07D493/22;C12P17/06;A01N43/90;A01P7/04;A01P5/00;C12R1/80
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 于躍

本發明涉及一種紅樹內生真菌中混源萜類化合物及其制備方法與應用，所述的混源萜類化合物具有化合物1、2所示的結構：

技術領域

本發明屬于紅樹內生真菌次級代謝產物領域，具體涉及一種紅樹內生真菌中 混元萜類化合物及其制備方法與應用。

背景技術

海洋來源的內生真菌結構新穎活性獨特的化合物重要來源之一。近年來，一 些新的活性化合物已經從真菌Penicillum中分離得到，例如：抗炎活性化合物chrysogenester，抑制α-葡萄糖苷酶的化合物chrysines B和C，具有細胞毒活性 的化合物penicimenolides B-D and penitalarins A-C，抗真菌化合物brocapyrrozin A。前期研究發現內生真菌Penicillum乙酸乙酯粗提物具有一定的抗蟲活性。

發明內容

本發明所述的紅樹內生真菌(Penicillum，以下簡稱TGM112)分離自紅樹 尖瓣海蓮，其菌種保藏信息：保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普 通微生物中心；保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院 微生物研究所；保藏日期：2018年11月9日；保藏編號：CGMCC No.16499； 分類命名：青霉Penicillium sp.。

本發明提供一種混元萜類化合物或其藥學上可接受的鹽，其特征在于所述的 混元萜類化合物具有化合物1、2所示的結構：

本發明的另一實施方案，提供一種同時制備化合物1、2的制備方法，其特 征在于包括如下步驟：

(1)配制種子培養基，將TGM112菌株接入種子培養基，26～28℃，培養3～4 天得種子培養液；

(2)將步驟(1)得到的種子培養液接入發酵培養基中，26～28℃靜置培養 21～24天得發酵物；

(3)將步驟(2)得到的發酵物中的發酵液和菌體分離，發酵液和菌體分別 用等體積的乙酸乙酯萃取3～5次，合并萃取液后減壓濃縮得到浸膏；

(4)步驟(3)得到的浸膏經過減壓硅膠柱層析，采用石油醚-乙酸乙酯按 100:0、90:10、80:20、70:30、60:40，50:50、40:60、30:70、20:80、10:90、0:100 梯度洗脫，每個梯度收集兩個柱體積，其中30:70梯度洗脫得到的餾分濃縮后經 Sephadex LH-20凝膠柱層析，洗脫劑為氯仿：甲醇＝1∶1，再經高效液相色譜 HPLC制備，色譜柱為Agilent C18,9.4×250mm，7μm，流速為2mL/min，流動 相為CH₃CN:H₂O＝45:55，最終得到化合物1；其中10:90梯度得到的餾分濃縮后 經Sephadex LH-20凝膠柱層析，洗脫劑為氯仿：甲醇＝1∶1，再經高效液相色譜 HPLC制備，色譜柱為Agilent C18,9.4×250mm，7μm，流速為2mL/min，流動 相為MeOH:H₂O＝45:55，最終得到化合物2。

其中所述洗脫劑或流動相的比例均為體積比；所述種子培養基中含有葡萄糖1.5％–3.0％、酵母膏0.1％–0.5％、蛋白胨0.1％–0.5％、粗海鹽0.11％–0.6％、適量 的水；所述發酵培養基中含有葡萄糖1.6％–3.5％、酵母膏0.1％–0.5％、蛋白胨0.1％– 0.5％、粗海鹽0.11％–0.6％、適量的水；上述百分比均為重量百分比；所述種子 培養基和發酵培養基均需120℃滅25–30分鐘。

本發明提供一種藥物組合物，其特征在于以本發明化合物1、2或其藥學上 可接受的鹽作為活性成分。

本發明提供的上述藥物組合物，還可包含其他殺蟲藥物；也可以包含藥學上 可接受的輔料(優選藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑)。上述藥物組合物 的劑型可以是固體制劑、半固體制劑或液體制劑。