[發明專利]一種快速高效制備總神經節苷脂的方法在審
| 申請號： | 201910197056.3 | 申請日： | 2019-03-15 |
| 公開（公告）號： | CN110003287A | 公開（公告）日： | 2019-07-12 |
| 發明（設計）人： | 孫國威;阮必武;穆寧 | 申請（專利權）人： | 無錫加萊克色譜科技有限公司 |
| 主分類號： | C07H1/08 | 分類號： | C07H1/08;C07H15/10 |
| 代理公司： | 無錫大揚專利事務所(普通合伙) 32248 | 代理人： | 郭晟杰 |
| 地址： | 214092 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 總神經節苷脂 高效制備 生物制藥領域 生產周期 中高壓系統 大孔樹脂 反相層析 浸提液 常壓 富集 自動化 濃縮 轉化 | ||
1.一種快速高效制備總神經節苷脂的方法，其特征在于包括以下步驟：
步驟一，總神經節苷脂的提取
a.取新鮮豬腦組織，或冷凍豬腦解凍后勻漿，按照豬腦和提取液的質量比1:（5~9）混合，攪拌1-2小時，靜置后抽濾取清液；
b.向a取得的清液中加入0.3-0.4倍清液體積的純水，攪拌0.5h以上，靜置過夜，分層后收集上層清液；
c.向b收集的清液中加入0.3-0.4%氫氧化鈉固體，控制溫度50-60℃進行消化1.5-2h，得到總神經節苷脂浸提液；
步驟二，總神經節苷脂的富集濃縮
a.對步驟一中得到的總神經節苷脂浸提液進行減壓蒸餾，準備進行反相層析吸附；
b.反相層析介質裝填于動態軸向壓縮柱中，以20-25%甲醇水溶液平衡動態軸向壓縮柱，將a中濃縮后的浸提液以10-12BV/h流速上樣至動態軸向壓縮柱中，上樣體積為70-90BV；
c.上樣完成后，繼續用20-25%甲醇水溶液沖洗動態軸向壓縮柱3-5BV，流速5-6BV/h；
d.洗脫：用75-80%甲醇水溶液以2-3BV/h流速洗脫動態軸向壓縮柱，收集洗脫液；
e.再生：用100%甲醇溶液以3-5BV/h流速清洗動態軸向壓縮柱；
步驟三，將步驟二d中收集的洗脫液經40℃水浴減壓濃縮，抽濾，干燥，既得總神經節苷脂。
2.如權利要求1所述的快速高效制備總神經節苷脂的方法，其特征在于所述步驟一a中的提取液由甲醇、氯仿和水混合而成，其體積比為甲醇：氯仿：水=2:1:1。
3.如權利要求2所述的快速高效制備總神經節苷脂的方法，其特征在于所述步驟二a的減壓蒸餾的目的在于去除總神經節苷脂浸提液中的氯仿，濃縮到浸提液中的甲醇濃度降低至10-20%。
4.如權利要求1所述的快速高效制備總神經節苷脂的方法，其特征在于所述反相層析介質選用Bettsep BP70介質。
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