[發明專利]一種利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法

有效

• 申請號: 201910184327.1
• 申請日: 2019-03-12
• 公開（公告）號: CN109744149B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發明（設計）人: 官玲;劉吉振;張誼模;邸青;董昕;何平;李燕;吳霜
• 申請（專利權）人: 重慶市農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 重慶市信立達專利代理事務所(普通合伙) 50230
• 代理人: 包曉靜

本發明屬于兒菜種植技術領域，公開了一種利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法，用解剖刀切取優良株腋芽，裝入尼龍網袋中；將腋芽切分成多個小腋芽塊，接種在預培養基1/2MS上；接種在含有0.1mg·L^?1NAA和0.3mg·L^?16?BA的誘導培養基上；以培養30d后的不定芽為外植體，在MS增殖培養基上添加0.3mg·L^?16?BA和0.1mg·L^?1NAA，繼代培養30d后選擇壯苗接入生根培養基中。本發明選擇目標性狀優良的單株作為材料進行兒菜組織培養及快繁，越冬后試管苗移栽到大田，不進行營養生長，直接進入生殖生長，以期獲得質量好的種子，開展兒菜良種選育，為生產提供優質種子。

技術領域

本發明屬于兒菜種植技術領域，尤其涉及一種利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法。

背景技術

兒菜，學名抱子芥(Brassica juncea var.gemmifera Lin.)，是十字花科蕓薹屬芥菜種的一個變種，俗稱角兒菜、芽芽菜、抱兒菜等，于1987年由楊以耕、陳才林、蘇修富等命名為抱子芥。兒菜幼苗生長到一定階段，從葉腋處長出的芽不斷膨大，形成食用器官兒芽(芽塊)。兒菜營養豐富，品質細嫩，味道鮮美，吃法多樣，炒、燴、炸、涮、涼拌、作湯、腌泡均可，是西南地區的特色蔬菜之一。兒菜屬于兩年生植物，播種當年進行營養生長，越冬后翌年春夏季抽苔、開花、結實。兒菜留種主要有兩種方法，即大株留種和小株留種。大株留種目標性狀選擇容易，但由于兒菜普遍存在抗逆性差、莖腐病重等問題，莖及芽塊在第一年就可能空心腐爛，造成第二年收獲不到種子或是種子質量差；小株留種目標性狀選擇難，導致兒菜種子純度不達標。

綜上所述，現有技術存在的問題是：兒菜留種方法存在抗逆性差、莖腐病重；目標性狀選擇難，導致兒菜種子純度不達標。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供了一種利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法。

本發明是這樣實現的，一種利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法，所述利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法用解剖刀切取優良株腋芽，裝入尼龍網袋中；將腋芽切分成多個1cm³的小腋芽塊，接種在預培養基1/2MS上進行培養，對芽塊進行初步篩選，得到無菌、狀態良好的芽塊；接種在含有0.1mg·L^-1NAA和0.3mg·L^-16-BA的誘導培養基上；以培養30d后的不定芽為外植體，在MS增殖培養基上添加0.3mg·L^-16-BA和0.1mg·L^-1NAA，得到芽叢，增加幼苗數量，達到擴繁目的，繼代培養30d后選擇壯苗接入生根培養基中。

進一步，用解剖刀切取優良株腋芽，每株取15-20個腋芽，裝入一個尼龍網袋中并編號，經流水沖洗一夜后，放入加有洗潔精的水溶液中攪拌20分鐘，脫水后用雙蒸水沖洗3-5次。

進一步，所述裝入尼龍網袋中后需要：

在超凈臺中，將兒菜放入70％的酒精溶液中消毒30s，倒去酒精，用無菌水洗3次，再放入加有幾滴吐溫的2％的次氯酸鈉溶液消毒20min，期間不斷攪拌，倒掉溶液，用無菌水沖洗4～5遍，得到無菌的外植體；

以1/2MS、MS為基本培養基，所有培養基添加30g/L白砂糖，8g/L瓊脂，激素濃度配比按培養階段進行調整，調節pH＝5.8，在121℃高壓滅菌20min。培養溫度為25±2℃，每天光照12～14h，光照強度1500～2000Lx。

進一步，取出腋芽放在滅過菌的濾紙上，剝去表面1-2層葉片，從腋芽中部橫向剖開，將腋芽切分成多個1cm³的小腋芽塊，接種在預培養基1/2MS上進行培養；每個培養皿上接種8個外植體。