[發明專利]一種利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法

有效

• 申請號: 201910184327.1
• 申請日: 2019-03-12
• 公開（公告）號: CN109744149B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發明（設計）人: 官玲;劉吉振;張誼模;邸青;董昕;何平;李燕;吳霜
• 申請（專利權）人: 重慶市農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 重慶市信立達專利代理事務所(普通合伙) 50230
• 代理人: 包曉靜

1.一種利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法，其特征在于，用解剖刀切取優良株腋芽，每株取15-20個腋芽，裝入一個尼龍網袋中并編號，經流水沖洗一夜后，放入加有洗潔精的水溶液中攪拌20分鐘，脫水后用雙蒸水沖洗3-5次；

在超凈臺中，將兒菜放入70％的酒精溶液中消毒30s，倒去酒精，用無菌水洗3次，再放入加有幾滴吐溫的2％的次氯酸鈉溶液消毒20min，期間不斷攪拌，倒掉溶液，用無菌水沖洗4～5遍，得到無菌的外植體；

以1/2MS、MS為基本培養基，所有培養基添加30g/L白砂糖，8g/L瓊脂，激素濃度配比按培養階段進行調整，調節pH＝5.8，在121℃高壓滅菌20min；培養溫度為25±2℃，每天光照12～14h，光照強度1500～2000Lx；

將腋芽切分成多個1cm³的小腋芽塊，接種在預培養基1/2MS上進行培養；

接種在含有0.1mg·L^-1NAA和0.3mg·L^-16-BA的MS誘導培養基上；以培養30d后的不定芽為外植體，在MS增殖培養基上添加0.3mg·L^-16-BA和0.1mg·L^-1NAA，繼代培養30d后選擇壯苗接入生根培養基中；生根培養基以MS為基本培養基，添加0.1mg·L^-1NAA；

將獲得的帶根分生苗，進行2-3天的開瓶煉苗，清洗除去附在根上的培養基，移栽到溫室大棚中。

2.如權利要求1所述的利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法，其特征在于，消毒后取出腋芽放在滅過菌的濾紙上，剝去表面1-2層葉片，從腋芽中部橫向剖開，將腋芽切分成多個1cm³的小腋芽塊，接種在預培養基1/2MS上進行培養；每個培養皿上接種8個外植體。

3.如權利要求1所述的利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法，其特征在于，預培養后，選擇無污染的外植體，接種在含有0.1mg·L^-1NAA和0.3mg·L^-16-BA的MS誘導培養基上，每瓶接種5個外植體。

4.如權利要求1所述的利用芽塊進行兒菜組織培養及繁殖的方法，其特征在于，以培養30d后的不定芽為外植體，在MS增殖培養基上添加0.3mg·L^-16-BA和0.1mg·L^-1NAA，每瓶接種4個外植體；繼代培養30d后選擇壯苗接入生根培養基中，其余小苗繼續進行增殖培養。