[發明專利]一種荔枝核中總黃酮含量的測定方法

在審

• 申請號: 201910180110.3
• 申請日: 2019-03-11
• 公開（公告）號: CN110044832A
• 公開（公告）日: 2019-07-23
• 發明（設計）人: 奉建芳;羅偉生;梁建欽;馮宇;馮茵怡;林憶龍
• 申請（專利權）人: 廣西中醫藥大學
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N21/78
• 代理公司: 南寧市來來專利代理事務所(普通合伙) 45118
• 代理人: 來光業

1.一種荔枝核中總黃酮含量的測定方法，該方法為紫外分光光度法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）對照品溶液的配制：精密稱取對照品8.00～12.00 mg，用甲醇溶解并定容，制得質量濃度為1.00 mg/mL的對照品溶液；再用甲醇稀釋，制成質量濃度分別為0、10、25、50、100、150、200 μg/mL 的系列對照品溶液，備用；

（2）供試品溶液的制備：精密稱取粉碎至10～20目的荔枝核粉末1.00～2.00g，加入50～100mL的體積濃度為50%的甲醇，于88～95℃條件下回流提取30～50min，趁熱過濾，量取1mL至容量瓶中稀釋25～50倍，得到供試品溶液，備用；

（3）顯色反應液的配制：精密量取正丁醇、濃鹽酸、10%硫酸鐵銨溶液按一定的比例混合均勻，制得顯色反應液，備用；

（4）標準曲線的繪制：精密吸取不同濃度的對照品溶液1.0 mL于10mL具塞試管中，加入9.0 mL顯色反應液，塞緊塞子并搖勻，置于沸水浴中加熱40～50min后，立即取出，用冰水冷卻5～6 min，取出，恢復至室溫后，在550 nm處以空白試劑調零，測定吸光值A₅₅₀，以吸光值為縱坐標，原花青素濃度為橫坐標，繪制吸光度值-原花青素濃度的標準曲線，進行線性回歸分析，得到回歸方程；

（5）供試品溶液的測定：將步驟（2）制得的供試樣品溶液在510nm處測定吸光度，將吸光值代入回歸方程，計算得到供試品溶液的濃度，根據配制溶液時的稀釋倍數計算出荔枝核中總黃酮的含量。

2.根據權利要求1所述的荔枝核中總黃酮含量的測定方法，其特征在于：步驟（1）所述的對照品為花青素類的物質，包括原花青素A1，原花青素A2，原花青素B2，原花青素B4，原花青素。

3.根據權利要求1所述的荔枝核中總黃酮含量的測定方法，其特征在于：步驟（3）所述的顯色反應液，各物質的體積配比為：正丁醇90～94%，濃鹽酸6～7%，10%硫酸鐵銨溶液1.0～1.2%。

4.根據權利要求1所述的荔枝核中總黃酮含量的測定方法，其特征在于：步驟（3）所述的10%硫酸鐵銨溶液的制備方法為：精密稱取8.00～12.00 g硫酸鐵銨，用質量濃度為2mol/L的鹽酸溶解，制備成質量濃度為0.1g/mL的硫酸鐵銨溶液。

5.根據權利要求1所述的荔枝核中總黃酮含量的測定方法，其特征在于：步驟（3）所述的顯色反應液還可以為：體積濃度為0.1～30%的香草醛甲醇溶液與體積濃度為1～30%的鹽酸溶液，按照體積比1:1混合，現配現用，作為顯色反應液。

6.根據權利要求1所述的荔枝核中總黃酮含量的測定方法，其特征在于：該方法還可用于測定荔枝殼或荔枝核提取物中的總黃酮含量。