[發(fā)明專利]一種制備含量子點(diǎn)標(biāo)記的抗犬病毒抗體免疫層析試紙條的方法、制備的試紙條及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910173048.5
• 申請日: 2019-03-07
• 公開（公告）號: CN111665363B
• 公開（公告）日: 2023-10-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田克恭;王瑩;趙坤坤;張?jiān)S科
• 申請（專利權(quán)）人: 北京中科基因技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/533;G01N33/569
• 代理公司: 北京華夏正合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

本發(fā)明提供了一種制備含量子點(diǎn)標(biāo)記的抗犬病毒抗體免疫層析試紙條的方法，該方法通過優(yōu)化量子點(diǎn)與所述抗犬病毒抗體比例、抗體封閉液、抗體復(fù)溶液、標(biāo)記抗體和固定抗體濃度，實(shí)現(xiàn)了高靈敏度的檢測樣品中的病毒抗原，其較膠體金免疫層析試紙條靈敏度高50倍以上。且本發(fā)明的制備方法通用于多種抗犬病毒抗體對，對多種犬病毒抗體對制備的量子點(diǎn)標(biāo)記免疫層析試紙條均能靈敏檢測病毒抗原；同時保存期可延長至27個月。本發(fā)明還涉及該方法制備的量子點(diǎn)標(biāo)記免疫層析試紙條，以及包含有該量子點(diǎn)標(biāo)記免疫層析試紙條的試劑盒。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫測定法領(lǐng)域，具體涉及一種制備含量子點(diǎn)標(biāo)記的抗犬病毒抗體免疫層析試紙條的方法、制備的試紙條及試劑盒和應(yīng)用。

背景技術(shù)

量子點(diǎn)(Quantum dot,QD)又稱半導(dǎo)體納米晶，是一種由II-VI族或III-V族元素組成的、半徑小于或接近激子波爾半徑的納米熒光材料，多呈球形。量子點(diǎn)作為熒光材料具有優(yōu)異的熒光特性：擁有窄而對稱的熒光發(fā)射光譜，發(fā)射波長隨材料及粒徑大小不同而不同，具有寬泛且連續(xù)的吸收光譜，斯托克斯位移較大，從而使量子點(diǎn)易于實(shí)現(xiàn)單波長激發(fā)多波長同時發(fā)射的多色標(biāo)記功能。此外，相對于有機(jī)熒光染料，量子點(diǎn)具有很好的光穩(wěn)定性、耐光漂白、熒光效率高等優(yōu)點(diǎn)，且隨著量子點(diǎn)表面配基化學(xué)修飾技術(shù)的發(fā)展，量子點(diǎn)生物相容性及標(biāo)記效率的進(jìn)一步提高，使得相關(guān)量子點(diǎn)生物標(biāo)記物在科研、檢測領(lǐng)域中的應(yīng)用得到了進(jìn)一步拓展。

目前，量子點(diǎn)免疫層析技術(shù)主要應(yīng)用于人醫(yī)臨床疫病診斷、食品中有害物質(zhì)的檢測，其中人醫(yī)方面檢測的主要靶標(biāo)為血液或血清樣本，這些樣本受機(jī)體代謝物或排泄物中雜質(zhì)的干擾影響較小，特別地實(shí)驗(yàn)室階段未檢測實(shí)際樣品，如中國專利CN103529214A、CN103529216A；食品方面的檢測多以標(biāo)準(zhǔn)品或以標(biāo)準(zhǔn)品加標(biāo)回收試驗(yàn)檢測為主、實(shí)際樣品檢測較少，如李淑群的“基于膠體金和量子點(diǎn)免疫層析技術(shù)的研究及應(yīng)用”(蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文，2013)。而商品化的量子點(diǎn)免疫層析技術(shù)產(chǎn)品目前主要是深圳市金準(zhǔn)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司生產(chǎn)人醫(yī)方面的產(chǎn)品如降鈣素原(PCT)定量測定試劑盒，但其測定的靶標(biāo)單一、均為人血清、血漿、全血或末梢血，甚至不需要樣品處理液裂解待檢樣品中的靶標(biāo)即可完成檢測，暫未開發(fā)獸用犬類傳染病相關(guān)的量子點(diǎn)免疫層析技術(shù)產(chǎn)品。

而當(dāng)量子點(diǎn)免疫層析技術(shù)應(yīng)用于獸用疫病抗原的檢測時，由于臨床檢測樣品中獸用疫病檢測的靶標(biāo)本身存在很多雜質(zhì)或動物的代謝物，較為復(fù)雜，多為代謝物或排泄物如眼鼻拭子、咽拭子、肛拭子、糞便等，用樣品處理液處理后對其影響較大，這進(jìn)一步增加了檢測難度。

在現(xiàn)有技術(shù)中，針對感染犬的多種病毒抗原的檢測，往往需要針對性地制備含有特定抗體的試劑盒進(jìn)行檢測，同時制備的試劑盒也需要對其制備條件進(jìn)行多種條件的摸索和組合，費(fèi)時費(fèi)力，因此提供一種針對感染犬的多種病毒抗原的、能適應(yīng)多種特定抗體對的免疫層析試紙條的制備方法具有很強(qiáng)的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容