[發(fā)明專利]一種制備氯霉素的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910172579.2
• 申請(qǐng)日: 2019-03-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111662937B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝新開(kāi);黃曉飛;杜好勉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南引航生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12P13/02
• 分類號(hào): C12P13/02
• 代理公司: 蘇州彰尚知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32336
• 代理人: 潘劍

本發(fā)明的提供一種從廉價(jià)易得的對(duì)硝基苯甲醛和L?蘇氨酸在轉(zhuǎn)醛酶的作用下制備(2S,3R)?對(duì)硝基苯絲氨酸，此氨基酸中間體再進(jìn)行還原、二氯乙酰化就得到了目標(biāo)產(chǎn)物氯霉素。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種制備氯霉素的方法，屬于生物制藥和生物化工的技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

氯霉素是目前市場(chǎng)上最廣譜抗菌素藥物之一,其抗菌作用機(jī)制是與核蛋白體50S亞基結(jié)合，抑制肽酰基轉(zhuǎn)移酶，從而抑制蛋白質(zhì)合成。它對(duì)大多數(shù)革蘭氏陰性以及陽(yáng)性細(xì)菌、流感桿菌、百日咳桿菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、肺炎桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌、立克次體、沙眼衣原體等都能有效控制。其在生物醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用非常廣泛，因此探索一種溫和、高效、經(jīng)濟(jì)的方法制備氯霉素受到了廣大化學(xué)生物工作者的關(guān)注。

氯霉素，其結(jié)構(gòu)式如下所示：

目前工業(yè)制備氯霉素的方法是：以苯乙酮為起始原料，通過(guò)溴化、氨化、乙?；?、羥醛縮合、異丙醇鋁還原、水解脫保護(hù)、手性拆分以及二氯乙?；?步化學(xué)反應(yīng)制備的，流程如下：

此方法存在多個(gè)缺點(diǎn)：

1、此路線需要手性拆分，而拆分的理論收率只有50％，這導(dǎo)致了整條路線的收率在30％以下；另外拆分的步驟非常繁瑣，給工業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)很大的不便。

2、此路線中需要用到乙?；Ｗo(hù)，再脫保護(hù)，原子經(jīng)濟(jì)性較差并且反應(yīng)步驟的增加使得整體的收率降低，同時(shí)也對(duì)工業(yè)化生產(chǎn)增加了難度。

3、此路線還原步驟中使用異丙醇鋁，此過(guò)程產(chǎn)生大量難于處理的三廢，對(duì)環(huán)境危害非常大。

因此，探索一種溫和、高效、經(jīng)濟(jì)、對(duì)環(huán)境友好的氯霉素制備方法是非常有意義的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種簡(jiǎn)單易行的合成氯霉素的新方法，該方法操作簡(jiǎn)單，條件溫和，大幅度降低了生產(chǎn)的成本，適合大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明提供一種從廉價(jià)易得的對(duì)硝基苯甲醛和L-蘇氨酸在轉(zhuǎn)醛酶的作用下制備(2S,3R)-對(duì)硝基苯絲氨酸，此氨基酸中間體再進(jìn)行還原、二氯乙酰化就得到了目標(biāo)產(chǎn)物氯霉素，合成路徑如下所示：

優(yōu)選地，酶反應(yīng)過(guò)程中，添加磷酸吡哆醛作為輔酶。

優(yōu)選地，酶反應(yīng)在磷酸緩沖液中進(jìn)行。

優(yōu)選地，酶反應(yīng)結(jié)束后，氨基酸中間體無(wú)需純化直接進(jìn)行還原反應(yīng)。

進(jìn)一步的，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)醛酶催化制備(2S,3R)-對(duì)硝基苯絲氨酸的過(guò)程中,體系會(huì)釋放出一分子乙醛，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，乙醛量的累積會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)醛酶的失活，從而使得轉(zhuǎn)醛酶的用量比較大，并且反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率較低。

本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選，在酶反應(yīng)過(guò)程中添加乙醛還原酶使乙醛還原為乙醇；

進(jìn)一步的，本發(fā)明所述的乙醛還原為乙醇的體系為輔酶煙酰胺腺嘌呤雙核苷酸(NAD)的再生體系，反應(yīng)流程如下：。

優(yōu)選的，添加葡萄糖和葡萄糖脫氫酶實(shí)現(xiàn)輔酶NAD的再生：

優(yōu)選的，添加甲酸和甲酸脫氫酶實(shí)現(xiàn)輔酶NAD的再生：

優(yōu)選的，添加異丙醇和醇脫氫酶實(shí)現(xiàn)輔酶NAD的再生。再生過(guò)程如下所示：

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明并不限于以下實(shí)施例。