[發明專利]啶蟲脒原藥對蚯蚓繁殖的毒性試驗方法

在審

• 申請號: 201910169097.1
• 申請日: 2019-03-06
• 公開（公告）號: CN109975534A
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發明（設計）人: 王彥華;柳新菊;楊桂玲;王新全;王菲迪;張昌朋;王強
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 苗艷榮

本發明公開了啶蟲脒原藥對蚯蚓繁殖的毒性試驗方法，包括以下步驟：A、選取供試品和參比物質：選取97％啶蟲脒原藥為供試品，且選95％多菌靈為參比物質，通過對同時設置空白對照組，本實現方法高效且精確，通過各處理設4個重復，每個重復10條蚯蚓，對照組設8個重復，且試驗組和空白對照組同時進行，增加了參考數據，提高數據的相互對照，較好的平衡和抵消了無關變量的影響，使實驗結果更具有說服力，提高了數據的準確性，數據處理時，采用DPS統計分析軟件，對數據進行合理的分析和處理，提高了數據的分析準確性，提高了試驗結果準確性。

技術領域：

本發明屬于毒性試驗技術領域，特別涉及啶蟲脒原藥對蚯蚓繁殖的毒性試驗 方法。

背景技術：

啶蟲脒主要用于堿類殺蟲劑，對害蟲突觸受體具有神經阻斷作用，用于水稻、 蔬菜等作物，對各種蚜蟲、粉虱、水稻葉蟬和薊馬顯示了卓越活性，在研究啶蟲 脒原藥對蚯蚓影響時，需要對蚯蚓進行試驗，在其對蚯蚓繁殖影響的實驗中，現 有的試驗方法不夠系統化，試驗組和空白對照組比較不夠充分，降低了參考數據， 無法提高數據的相互對照，無法平衡和抵消了無關變量的影響，無法使實驗結果 更具有說服力，無法提高數據的準確性，數據處理時，對數據分析和處理不夠合 理，無法提高數據的分析準確性，無法提高試驗結果準確性。

發明內容：

本發明的目的就在于為了解決上述問題而提供啶蟲脒原藥對蚯蚓繁殖的毒 性試驗方法，解決了現有的設備存在的缺點。

為了解決上述問題，本發明提供了一種技術方案：

啶蟲脒原藥對蚯蚓繁殖的毒性試驗方法，包括以下步驟：

A、選取供試品和參比物質：選取97％啶蟲脒原藥為供試品，且選95％多菌靈 為參比物質；

B、選取試驗儀器：BSA223S型電子天平、TSC-100型電子臺秤、JJ-5水泥 膠砂攪拌機、Y112M-4攪拌機、SX-620型筆式pH計、KQ2200型超聲波清洗器、 ZOGLABDSR-TH-RA型溫濕度記錄儀、移液槍、容量瓶、量筒和燒杯等；

C、選取供試生物：選擇赤子愛勝蚯蚓作為供試生物，且蚯蚓引入后在溫度 為18.0℃-22.0℃，相對濕度為70％-90％，黑暗條件下進行飼養，試驗前，將 選好的試驗蚯蚓要在人工土壤中馴養7d，馴養期間的食物與試驗期間的食物相 同，試驗選用體重在0.300g-0.600g之間的二月齡以上蚯蚓，試驗用人工土壤 由10％草炭、20％高嶺黏土、70％工業石英砂和0.1-0.3％碳酸鈣組成，充分混勻后 待用；

D、調整試驗條件：試驗溫度為20±2℃，光照強度為400Lux–800Lux， 光照∶黑暗時間比為16h∶8h，試驗開始后1d、8d、15d和22d，向每個 容器添加約5.00g磨碎的燕麥片到土壤表面并用適量的水濕潤，成蚓在試驗開 始后第28d移出，并向每個容器補充約5.00g食物，剩余時間不再飼喂，移出 成蚓后，含有蚓繭的土壤在相同條件下繼續培養4周；

E、試驗濃度設計：試驗選取的97％啶蟲脒原藥以1.52mg a.i./kg_干土為最 高濃度，按等比系數1.67設置1.52、0.910、0.545、0.326、0.195、0.117、 0.070、0.042mg a.i./kg_干土共8個處理濃度，同時設置不加藥處理為空白對照；；

F、試驗溶液的配制：試驗溶液包括97％啶蟲脒原藥溶液和95％多菌靈原藥溶 液，其配制步驟如下：

a、用BSA223S型電子天平稱取97％啶蟲脒原藥樣品0.500g于一次性塑料 杯中，用自來水定容到100mL后，可得濃度為4850mg a.i./L的試驗母液，試 驗時，用自來水稀釋至5.07、3.04、1.82、1.09、0.652、0.390、0.234、0.140 mg a.i./L各試驗濃度；