[發明專利]一種用于純化血紅蛋白的陰離子交換層析柱的清洗方法有效
| 申請號： | 201910167751.5 | 申請日： | 2019-03-06 |
| 公開（公告）號： | CN109847406B | 公開（公告）日： | 2021-03-30 |
| 發明（設計）人： | 游可為;石松;閆曉玲;孫新宇;史國營;陳浩源 | 申請（專利權）人： | 潤方（北京）生物醫藥研究院有限公司 |
| 主分類號： | B01D15/20 | 分類號： | B01D15/20;B01D15/36 |
| 代理公司： | 北京市邦道律師事務所 11437 | 代理人： | 薛艷 |
| 地址： | 101111 北京市大興區經濟*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 純化 血紅蛋白 陰離子 交換 層析 清洗 方法 | ||
1.一種用于純化血紅蛋白的陰離子交換層析柱的清洗方法，其包括如下步驟：
a、將純化血紅蛋白后的陰離子交換層析柱的進出液口調整，使清洗液體通過層析柱的方向與處理血紅蛋白的方向相反；
b、用去離子水清洗所述層析柱，去掉所述層析柱在使用后殘留的洗脫液，然后用酸性水溶液清洗所述層析柱，所述酸性水溶液為草酸；
c、用去離子水清洗所述層析柱洗掉草酸，然后用含有Trion X-100和乙二胺四乙酸的水溶液清洗所述層析柱，該水溶液的PH值為4.3-5.5；
d、用去離子水清洗所述層析柱，洗掉Trion X-100和乙二胺四乙酸。
2.如權利要求1所述的用于純化血紅蛋白的陰離子交換層析柱的清洗方法，其中，所述步驟b中，所述酸性水溶液的摩爾濃度為0.1-0.3M。
3.如權利要求2所述的用于純化血紅蛋白的陰離子交換層析柱的清洗方法，其中，所述步驟b中，所述酸性水溶液的摩爾濃度為0.3M。
4.如權利要求1所述的用于純化血紅蛋白的陰離子交換層析柱的清洗方法，其中，所述步驟c中，所述含有Trion X-100和乙二胺四乙酸的水溶液中，Trion X-100的體積濃度為0.5%-2% ，乙二胺四乙酸的摩爾濃度為0.1-0.3M。
5.如權利要求4所述的用于純化血紅蛋白的陰離子交換層析柱的清洗方法，其中，所述步驟c中，所述含有Trion X-100和乙二胺四乙酸的水溶液中，Trion X-100的體積濃度為2%，乙二胺四乙酸的摩爾濃度為0.3M。
6.如權利要求1或3所述的用于純化血紅蛋白的陰離子交換層析柱的清洗方法，其中，所述步驟c中，所述含有Trion X-100和乙二胺四乙酸的水溶液的PH值為4.3。
7.如權利要求1所述的用于純化血紅蛋白的陰離子交換層析柱的清洗方法，其中，所述層析柱內的填料型號為Q Sepharose X L。
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