[發(fā)明專利]水溶性化妝品中耐熱大腸菌群定性標(biāo)準(zhǔn)樣品及制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910149276.9
• 申請(qǐng)日: 2019-02-28
• 公開（公告）號(hào): CN109762870A
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧行安;陳瀟;凌莉;馬文麗;林立民;潘裕紅;石雨婷;趙紅陽
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): C12Q1/10
• 分類號(hào): C12Q1/10;C12Q1/24
• 代理公司: 大連博晟專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 21236
• 代理人: 于忠晶

1.水溶性化妝品中耐熱大腸菌群定性標(biāo)準(zhǔn)樣品，其特征是：包括目標(biāo)菌群與背景菌群，所述目標(biāo)菌群由大腸埃希氏菌、陰溝腸桿菌、肺炎克雷伯菌組成，所述背景菌群由蠟樣芽胞桿菌、金黃色葡萄球菌組成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水溶性化妝品中耐熱大腸菌群定性標(biāo)準(zhǔn)樣品，其特征是：所述樣品基體為化妝水，化妝水體積分?jǐn)?shù)為0.5%；保護(hù)劑以海藻糖和無菌水組成，其中海藻糖體積分?jǐn)?shù)為10％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的水溶性化妝品中耐熱大腸菌群定性標(biāo)準(zhǔn)樣品，其特征是：所述樣品中目標(biāo)菌群的目標(biāo)濃度為10²～10³ CFU/mL，背景菌群的目標(biāo)濃度為10³ CFU/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水溶性化妝品中耐熱大腸菌群定性標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是：包括凍干保護(hù)劑的配制、樣品凍干、樣品的均勻性和穩(wěn)定性試驗(yàn)、樣品定值四個(gè)步驟，其中樣品凍干過程為：菌株復(fù)蘇傳代—增菌—菌懸液配制—凍干—包裝—儲(chǔ)存，具體過程為：

（1）菌株復(fù)蘇傳代

將標(biāo)準(zhǔn)菌株接種到營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基中，在36±1℃下使其復(fù)蘇和生長，并對(duì)復(fù)蘇的菌株進(jìn)行鑒定；

（2）增菌

目標(biāo)菌群培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期末，背景菌群培養(yǎng)至穩(wěn)定期，從斜面刮取菌落，加到10mL的凍干保護(hù)劑中制成相應(yīng)單一菌種的菌液；

（3）菌懸液配制

將上一過程得到的菌液與凍干保護(hù)劑混合，按目標(biāo)菌群的目標(biāo)濃度10²～10³ CFU/mL和背景菌群的目標(biāo)濃度10³ CFU/mL配制菌懸液，分別配制2個(gè)目標(biāo)菌的菌懸液和3個(gè)背景菌的菌懸液，分別按1:1體積比混合形成目標(biāo)菌群懸液和背景菌群懸液，再將目標(biāo)菌群懸液與背景菌群懸液按1:1體積比混合，得到混合菌懸液，置于磁力攪拌器上不斷攪拌，1：100比例添加化妝水，充分?jǐn)嚢杌靹蚝蠓盅b到樣品瓶中，加上瓶塞，但要留有空隙，不要蓋實(shí)；

（4）凍干和包裝

將裝有混合菌懸液的樣品瓶開蓋放入凍干機(jī)中，冷凍干燥50~55h，當(dāng)樣品冷凍干燥結(jié)束后，直接進(jìn)行箱內(nèi)加塞，關(guān)閉機(jī)器，樣品瓶中樣品為真空狀態(tài)；

（5）儲(chǔ)存

將樣品放置在-15~-20℃條件下避光保存，從全部樣品中隨機(jī)挑選樣品發(fā)放給實(shí)驗(yàn)室或進(jìn)行均勻性和穩(wěn)定性試驗(yàn)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶性化妝品中耐熱大腸菌群定性標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是：所述樣品基體為化妝水，化妝水體積分?jǐn)?shù)為0.5%；保護(hù)劑以海藻糖和無菌水組成，其中海藻糖體積分?jǐn)?shù)為10％。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶性化妝品中耐熱大腸菌群定性標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備方法，其特征是：所述樣品的均勻性和穩(wěn)定性試驗(yàn)按照GB/T 15000.3-2008《標(biāo)準(zhǔn)樣品工作導(dǎo)則（3）標(biāo)準(zhǔn)樣品定值的一般原則和統(tǒng)計(jì)方法》進(jìn)行。