[發(fā)明專利]一種同時(shí)檢測(cè)四種出血熱病毒的納米金生物傳感器及檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910148421.1
• 申請(qǐng)日: 2019-02-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110042173A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾令文;趙錦
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院
• 主分類號(hào): C12Q1/70
• 分類號(hào): C12Q1/70;C12Q1/6825;C12N15/11
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種同時(shí)檢測(cè)四種出血熱病毒的納米金生物傳感器，其特征在于，包括基底、樣品墊、吸收墊、硝化纖維薄膜和結(jié)合墊，所述樣品墊和吸收墊固定于所述基底的兩端，所述硝化纖維薄膜固定于所述基底的中部；所述吸收墊和所述硝化纖維薄膜之間有2-3mm的重疊，所述硝化纖維薄膜和所述結(jié)合墊之間有2-3mm的重疊，所述結(jié)合墊和所述樣品墊之間有2-3mm的重疊；所述結(jié)合墊上具有金納米粒子DNA探針；所述金納米粒子DNA探針包括：

漢坦病毒金納米粒子DNA探針：S-n-GGACAACTTCCACTTAGGGGA；

基孔肯雅熱病毒金納米粒子DNA探針：S-n-CTACAGCCCCATGGTACTGG；

登革熱病毒金納米粒子DNA探針：S-n-GCTGAAACGCGAGAGAAACC；

埃博拉病毒金納米粒子DNA探針：S-n-TCCAACAGCTTGGCAATCAGT。

2.一種利用權(quán)利要求1所述的同時(shí)檢測(cè)四種出血熱病毒的納米金生物傳感器的檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、病原體裂解后，RNA提取采用磁性納米顆粒富集核酸，經(jīng)過(guò)洗脫后進(jìn)一步進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄；

S2、反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物再次使用磁性納米顆粒進(jìn)行篩選，最終洗脫下來(lái)的核酸加入到等溫鏈置換擴(kuò)增反應(yīng)體系中并置入37℃水浴鍋中，經(jīng)過(guò)30min的反應(yīng)后，擴(kuò)增產(chǎn)物作為檢測(cè)樣品滴加到樣品墊上，5min后用肉眼觀察結(jié)果。