[發明專利]一種鴨呼腸孤病毒疫苗及其制備方法有效
| 申請號： | 201910147000.7 | 申請日： | 2019-02-27 |
| 公開（公告）號： | CN109718370B | 公開（公告）日： | 2019-11-29 |
| 發明（設計）人： | 張毓金;嚴悌昆;謝秉超;黃淑芬;張桂平 | 申請（專利權）人： | 廣東漁躍生物技術有限公司 |
| 主分類號： | A61K39/15 | 分類號： | A61K39/15;A61P31/14;C12N7/00;C12N7/02 |
| 代理公司： | 44416 廣州科沃園專利代理有限公司 | 代理人： | 張帥<國際申請>=<國際公布>=<進入國 |
| 地址： | 511500 廣東省清遠市清城區石角鎮廣州(*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 呼腸孤病毒 病毒滴度 呼腸孤病毒疫苗 滅活疫苗 制備 傳代 血清中和抗體 生物反應器 細胞 病毒增殖 關鍵因素 免疫效果 穩定生產 原代細胞 高滴度 免疫鴨 抗原 毒種 鴨胚 增殖 接種 疫苗 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種鴨呼腸孤病毒疫苗的制備方法，特征在于，
包括如下步驟：
(1)BHK-21細胞的傳代與培養：將BHK-21細胞，用胰酶消化分散，加入含雙抗的6%新生牛血清的DMEM培養液在微載體反應器中37℃、5%CO2培養至細胞單層后，棄去原培養液，再用含有2mM的谷氨酰胺、0.2mM的N-N-二乙基-1-4-苯二胺的無血清DMEM培養液清洗細胞，用于鴨呼腸孤病毒接種；
(2)病毒的接種和培養：將鴨呼腸孤病毒毒種按終體積1:500接種到步驟①制備的細胞，并在37℃吸附45分鐘后吸棄病毒液，在用1.5%新生牛血清的DMEM培養液于37℃、5%CO2培養至細胞，出現明顯病變時終止；
(3)病毒的病毒收集、濃縮、純化：將上述接種的病變細胞凍融，離心后收集上清液得到病毒原液；通過超濾濃縮上述病毒液即為制苗病毒液；
(4)病毒滅活：采用0.1%福爾馬林滅活病毒，即為疫苗抗原；
(5)使用疫苗抗原配置疫苗制劑。
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