[發明專利]一種南瓜籽蛋白水解物及其制備方法

在審

• 申請號: 201910143620.3
• 申請日: 2019-02-27
• 公開（公告）號: CN109880869A
• 公開（公告）日: 2019-06-14
• 發明（設計）人: 何海艷;楊愛萍;蔣彩云;張睿;崔逸
• 申請（專利權）人: 江蘇經貿職業技術學院
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34
• 代理公司: 上海統攝知識產權代理事務所(普通合伙) 31303
• 代理人: 辛自豪

本發明涉及一種南瓜籽蛋白水解物及其制備方法，屬于分離純化領域，其主要包括下述步驟：步驟A，酶解法提取水解蛋白；步驟B，將步驟A得到的蛋白水解物置于有5?10kDa超濾膜的超濾裝置中，超濾7?8h，取其截留分子量；同上操作，將余下的水解物分別經過3?5kDa，1?3kDa，小于1kDa的超濾膜，在超濾結束后分別取其截留分子量獲得四組不同的分子量肽段，冷凍干燥。結果顯示，南瓜籽堿性蛋白酶水解中小于1kDa組分活性較好，小于1kDa的ORAC值為745.62μmol TE/g。從測得的ORAC值可以看出南瓜籽蛋白水解物的抗氧化性能較強，在分子量肽段1?3kDa時氧自由基吸附能力值最高，為787.18μmol TE/g。

技術領域

本發明屬于分離純化技術領域，涉及一種南瓜籽蛋白水解物及其制備方法。

背景技術

游離基是生命活動中所產生的，它在機體活動中有著重要的作用，但過量的游離基容易對人體形成氧化性的損傷。許多報道中也都指出了身體的衰老和患有的疾病都與游離基的氧化性能有關。抗氧化劑不僅可以去除氧游離基，還可以抑止、緩解氧化反應的速度。所以，近年來市場上出現了越來越多各種各樣的抗氧化劑。現在的人們對食品安全的認識有了很大的提高，對合成的抗氧化劑也有著一定的了解，知道合成礦氧化劑具有一定的副作用。因此，天然抗氧化劑的研發也就順理成章的成為新的焦點。很多的研究表示可食用性的抗氧化肽分子質量相對較低，具有較低的成本，容易被機體吸收，對身體健康安全無危害等特點，被認為是一種良好的天然抗氧化劑。在許多動物和植被蛋白以及它們的肽中發現了含有較高的抗氧化性能。

南瓜籽中含有許多的品質較好蛋白質，因此，研究一種具有高抗氧化性能的南瓜籽蛋白水解物及其制備方法具有十分重要的意義。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種南瓜籽蛋白水解物及其制備方法。

為了達到上述目的，本發明采用如下的技術方案：

一種南瓜籽蛋白水解物的制備方法，其包括下述步驟：

步驟A，采用酶解法提取水解南瓜籽蛋白；

步驟B，將步驟A得到的蛋白水解物置于安有5-10kDa超濾膜的超濾裝置中超濾，取其截留分子量；依次采用安有3-5kDa的超濾膜、1-3kDa的超濾膜和小于1kDa的超濾膜的超濾裝置對剩余的水解物進行超濾，取其截留分子量，共獲得四組不同的分子量肽段，冷凍干燥。

作為優選的技術方案：

如上所述的南瓜籽蛋白水解物的制備方法，所述步驟B具體為：將步驟A得到的蛋白水解物置于安有5-10kDa超濾膜的超濾裝置中超濾7-8h；依次采用安有3-5kDa的超濾膜、1-3kDa的超濾膜和小于1kDa的超濾膜的超濾裝置對剩余的水解物超濾7-8h，取其截留分子量肽段，冷凍干燥。

如上所述的南瓜籽蛋白水解物的制備方法，所述采用酶解法提取水解南瓜籽蛋白是指使用堿性蛋白酶或中性蛋白酶對南瓜籽蛋白進行水解。

如上所述的南瓜籽蛋白水解物的制備方法，所述步驟A包括下述步驟：

步驟一，南瓜籽粕粉的制備；

將南瓜籽在80-90℃下干燥1-3h至水分恒重，然后進行粉碎，索氏抽提進行除油，風干，最后過60-80目篩，得到南瓜籽粕粉；

步驟二，南瓜籽蛋白的制備；

將步驟一得到的南瓜籽粕粉分散于蒸餾水中，調節分散液pH值至8.5-9.5并保持不變，將分散液置于40-50℃水浴鍋中攪拌1.5-2.5h，室溫下靜置1.5-2.5小時；以1500-2500r/min的轉速離心10-40min，得到下層沉淀蛋白質；將下層沉淀蛋白質取出，冷凍干燥即得南瓜籽蛋白，其中蒸餾水的體積為南瓜籽粕體積的8-12倍；