[發明專利]用于生成對抗細胞表面抗原的結合劑的方法和組合物

有效

• 申請號: 201910143060.1
• 申請日: 2014-09-22
• 公開（公告）號: CN110058023B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 陳艷;S·沙瑪
• 申請（專利權）人: X博迪公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平;袁元

本發明提供了用于識別結合多肽(例如抗體或其抗原結合片段)的方法和組合物，其中所述的結合多肽特異性地結合細胞表面抗原。本發明的方法總體而言包括將結合多肽的多樣的核酸展示文庫與細胞外部表面上的細胞表面抗原接觸；以及由所述的文庫分離至少一種文庫的成員，該成員特異性地結合所述的細胞的外部表面上的細胞表面抗原。本發明還提供了用于本發明的方法中的新的核酸展示文庫(例如DNA展示文庫)。

本申請是申請日為2014年9月22日、申請號為2014800521774、發明名稱為“用于生成對抗細胞表面抗原的結合劑的方法和組合物”的發明專利申請的分案申請。

相關申請

本申請要求2013年9月23日提交的美國臨時申請No.61/881,203的優先權，該申請的內容以引用方式全部并入本文。

背景技術

結合多肽(例如抗體及其片段)作為治療劑和診斷劑在商業上是重要的。用于結合多肽的傳統的篩選方法通常使用可溶性的抗原。然而，對于某些細胞表面抗原而言，當該抗原由原生質膜上溶解時，在這些抗原上的構象表位改變，從而導致不能生成可以識別天然抗原的結合多肽。因此，本領域需要用于結合多肽的新的篩選方法，其中所述的結合多肽在它們的天然構象下可以特異性地結合細胞表面抗原。

發明概述

本發明提供了用于識別特異性結合細胞表面多肽的結合多肽(例如抗體或其抗原結合片段)的方法和組合物。本發明的方法總體而言包括將結合多肽的多樣的核酸展示文庫與細胞外部表面上展示的細胞表面抗原接觸；以及由所述的文庫分離至少一種文庫的成員，該成員與細胞外部表面上的細胞表面抗原特異性地結合。本發明的方法和組合物是特別有利的，原因在于它們允許快速地識別與天然形式的靶細胞表面抗原結合的結合多肽，以及具有新的表位特異性和功能性質(例如內化、激動、拮抗或變構調控性質)的結合多肽。這些方法和組合物還允許識別新的治療用途的細胞類型特異性抗原或表位。本發明還提供了新的V-結構域(例如VH和/或VL結構域)核酸展示文庫(例如DNA展示文庫)，其可以用于篩選新的結合多肽。

本發明還涉及以下項目：

1.一種識別特異性結合細胞表面抗原的結合多肽的方法，該方法包括：

a.將第一細胞類型與結合多肽的多樣的核酸展示文庫接觸，其中所述的第一細胞類型在外部表面上展示細胞表面抗體；以及

b.由所述的文庫分離至少一種文庫的成員，由此識別特異性地結合所述的細胞表面抗原的結合多肽，其中所述的文庫的成員特異性地結合在所述的第一細胞類型的外部表面上的細胞表面抗原。

2.項目1所述的方法，其中在步驟(a)之前，將所述的結合多肽的多樣的核酸展示文庫與第二細胞類型接觸，其中所述的第二細胞類型未展示在所述的外部表面上展示的抗原。

3.一種使用特異性地結合細胞表面抗原的結合多肽的方法，該方法包括：

a.將第一細胞類型與結合多肽的多樣的核酸展示文庫接觸，并由所述的文庫分離至少一種特異性地結合所述的第一細胞類型的文庫的成員，其中所述的第一細胞類型在所述的外部表面上展示細胞表面抗原；

b.將第二細胞類型與結合多肽的多樣的核酸展示文庫接觸，并由所述的文庫分離至少一種特異性地結合所述的第二細胞類型的文庫的成員，其中所述的第二細胞類型未展示在所述的外部表面上的細胞表面抗原；以及

c.選擇特異性地結合所述的第一細胞類型、但不結合所述的第二細胞類型的文庫的成員，由此識別特異性地結合所述的細胞表面抗原的結合多肽。

4.項目3所述的方法，其中步驟(a)和(b)是使用所述的文庫的分離的等分物平行實施的。

5.一種識別特異性地結合細胞表面抗原的結合多肽的方法，該方法包括：