[發(fā)明專利]一種巨噬細(xì)胞載藥微顆粒制劑及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910140156.2
• 申請(qǐng)日: 2019-02-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109893515B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-10-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 甘璐;韋朝晗;張曉瓊;楊祥良
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華中科技大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K9/50
• 分類號(hào): A61K9/50;A61K47/46;A61K47/26;A61K45/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

1.一種巨噬細(xì)胞載藥微顆粒制劑，其特征在于，包括細(xì)胞囊泡和包裹在所述細(xì)胞囊泡內(nèi)的藥物小分子有效成分，所述藥物小分子有效成分為二甲雙胍；

所述巨噬細(xì)胞載藥微顆粒制劑的制備方法包括：

S1、用含磷脂-聚乙二醇-甘露糖的培養(yǎng)基培養(yǎng)巨噬細(xì)胞，得到甘露糖修飾的巨噬細(xì)胞；S2、使用紫外線照射所述巨噬細(xì)胞使其凋亡，將高濃度藥物小分子和所述巨噬細(xì)胞進(jìn)行孵育，使藥物小分子被所述巨噬細(xì)胞攝取，收集所釋放的載藥微顆粒，即得；

所述巨噬細(xì)胞與所述磷脂-聚乙二醇-甘露糖的含量比為10⁶個(gè)：25μg，或所述巨噬細(xì)胞微顆粒與所述磷脂-聚乙二醇-甘露糖的含量比為1mg蛋白量：1μg。

2.一種巨噬細(xì)胞載藥微顆粒制劑，其特征在于，包括細(xì)胞囊泡和包裹在所述細(xì)胞囊泡內(nèi)的藥物小分子有效成分，所述藥物小分子有效成分為二甲雙胍；

所述巨噬細(xì)胞載藥微顆粒制劑的制備方法包括：

使用紫外線照射所述巨噬細(xì)胞使其凋亡，收集凋亡細(xì)胞所釋放的細(xì)胞囊泡，然后將所述細(xì)胞囊泡與磷脂-聚乙二醇-甘露糖及藥物小分子進(jìn)行孵育，使細(xì)胞囊泡被甘露糖修飾、藥物小分子被甘露糖修飾的細(xì)胞囊泡包裹，收集載藥微顆粒，即得；

所述巨噬細(xì)胞與所述磷脂-聚乙二醇-甘露糖的含量比為10⁶個(gè)：25μg，或所述巨噬細(xì)胞微顆粒與所述磷脂-聚乙二醇-甘露糖的含量比為1mg蛋白量：1μg。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的巨噬細(xì)胞載藥微顆粒制劑，其特征在于，

所述巨噬細(xì)胞為源自于人體外周血中的循環(huán)單核細(xì)胞、人源單核細(xì)胞系、小鼠骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞和小鼠單核/巨噬細(xì)胞系中的一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的巨噬細(xì)胞載藥微顆粒制劑，其特征在于，所述巨噬細(xì)胞載藥微顆粒的粒徑為400-600 nm。

5.一種如權(quán)利要求1所述的巨噬細(xì)胞載藥微顆粒制劑的制備方法，其特征在于，包括：

S1、用含磷脂-聚乙二醇-甘露糖的培養(yǎng)基培養(yǎng)巨噬細(xì)胞，得到甘露糖修飾的巨噬細(xì)胞；S2、使用紫外線照射所述巨噬細(xì)胞使其凋亡，將高濃度藥物小分子和所述巨噬細(xì)胞進(jìn)行孵育，使藥物小分子被所述巨噬細(xì)胞攝取，收集所釋放的載藥微顆粒，即得。

6.權(quán)利要求2所述的巨噬細(xì)胞載藥微顆粒制劑的制備方法，其特征在于，包括：

使用紫外線照射所述巨噬細(xì)胞使其凋亡，收集凋亡細(xì)胞所釋放的細(xì)胞囊泡，然后將所述細(xì)胞囊泡與磷脂-聚乙二醇-甘露糖及藥物小分子進(jìn)行孵育，使細(xì)胞囊泡被甘露糖修飾、藥物小分子被甘露糖修飾的細(xì)胞囊泡包裹，收集載藥微顆粒，即得。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S1的具體操作為：在所述巨噬細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，加入磷脂-聚乙二醇-甘露糖進(jìn)行膜磷脂交換，使甘露糖交換至所述巨噬細(xì)胞膜表面，即可得到甘露糖修飾的巨噬細(xì)胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，用所述含有磷脂-聚乙二醇-甘露糖的培養(yǎng)基培養(yǎng)所述巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間至少為3天。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟S2中，所述載藥微顆粒的收集條件為：4-6℃的低溫下，以400-20000g的離心力收集。