[發(fā)明專利]用于檢測毛皮海豹糞便相關(guān)環(huán)狀單鏈DNA病毒的實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物、探針及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910138489.1
• 申請日: 2019-02-25
• 公開（公告）號: CN109825642A
• 公開（公告）日: 2019-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王靖飛;劉春國
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所（中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心哈爾濱分中心）
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;馬鑫

1.一種用于檢測毛皮海豹糞便相關(guān)環(huán)狀單鏈DNA病毒的實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物及探針組合，其特征在于，所述的引物由上游引物和下游引物組成，其中，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的探針的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的探針的5’端標(biāo)以熒光報(bào)告基團(tuán)，3’端標(biāo)以熒光淬滅基團(tuán)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的PCR引物及探針組合，其特征在于，所述的探針的5’端標(biāo)以熒光報(bào)告基團(tuán)Fam，3’端標(biāo)以熒光淬滅基團(tuán)Tam。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的PCR引物及探針組合，其特征在于，所述的PCR引物及探針用于檢測毛皮海豹糞便相關(guān)環(huán)狀單鏈DNA病毒時(shí)，其實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)體系為25μL，其中包括：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的PCR引物及探針組合，其特征在于，模板中病毒基因組濃度為1.52拷貝/μL以上。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的PCR引物及探針組合，其特征在于，所述的PCR引物及探針用于檢測毛皮海豹糞便相關(guān)環(huán)狀單鏈DNA病毒時(shí)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)條件為：95℃3分鐘；95℃15秒，60℃30秒，40個(gè)循環(huán)；在循環(huán)延伸時(shí)進(jìn)行熒光信號檢測。

6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的PCR引物及探針組合在制備檢測毛皮海豹糞便相關(guān)環(huán)狀單鏈DNA病毒試劑中的應(yīng)用。