[發(fā)明專利]一種高密度戊糖片球菌的發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910135666.0
• 申請日: 2019-02-20
• 公開（公告）號(hào): CN109593691A
• 公開（公告）日: 2019-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳祥;張茜茜;周櫻;諶頡
• 申請（專利權(quán)）人: 湖北華揚(yáng)科技發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 周文波

1.一種高密度戊糖片球菌的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于，其適用于發(fā)酵高密度戊糖片球菌，所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括質(zhì)量含量為0.05～1％的不溶性堿，且采用可溶性堿調(diào)節(jié)所述發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為5.0～6.5；

優(yōu)選地，所述不溶性堿選自碳酸鈣、氫氧化鎂以及氫氧化銅中的至少一種；

優(yōu)選地，所述可溶性堿選自氫氧化鈉、氫氧化鉀以及氫氧化鋰中的至少一種；

優(yōu)選地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)包括：葡萄糖1～5％、酵母自溶粉1～3％、硫酸錳0.025～0.05％、碳酸鈣0.05～1％、三水合乙酸鈉0.5～1.0％、硫酸鎂0.1～1％、磷酸氫二鉀0.1～1％、吐溫-80 0.1～1％、谷氨酸鈉0.1～1％、硅油0.01～0.2％以及余量為水。

2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種高密度戊糖片球菌的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)包括：葡萄糖1～5％、酵母自溶粉1.5～3％、硫酸錳0.025～0.05％、碳酸鈣0.05～1％、三水合乙酸鈉0.5～1.0％、硫酸鎂0.1～1％、磷酸氫二鉀0.1～1％、吐溫-800.1～1％、谷氨酸鈉0.1～1％、硅油0.01～0.2％以及余量為水。

3.根據(jù)權(quán)利要求2中所述的一種高密度戊糖片球菌的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)包括：葡萄糖1～5％、酵母自溶粉2～3％、硫酸錳0.025～0.05％、碳酸鈣0.05～1％、三水合乙酸鈉0.5～1.0％、硫酸鎂0.1～1％、磷酸氫二鉀0.1～1％、吐溫-800.1～1％、谷氨酸鈉0.1～1％、硅油0.01～0.2％以及余量為水。

4.一種高密度戊糖片球菌的發(fā)酵方法，其特征在于，其包括將戊糖片球菌接入權(quán)利要求1-3中任意一項(xiàng)所述的高密度戊糖片球菌的發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行厭氧發(fā)酵，得到高密度戊糖片球菌發(fā)酵液。

5.根據(jù)權(quán)利要求4中所述的一種高密度戊糖片球菌的發(fā)酵方法，其特征在于，將所述戊糖片球菌接入所述發(fā)酵培養(yǎng)基之前還包括分離和活化步驟；

優(yōu)選地，分離步驟為：將戊糖片球菌菌種接入分離培養(yǎng)基，得到戊糖片球菌單菌落，挑取長勢好的單菌落，將所述戊糖片球菌單菌落接入種子培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，并做保藏；

優(yōu)選地，活化步驟為：將保藏后的所述戊糖片球菌單菌接入活化培養(yǎng)基中進(jìn)行活化及擴(kuò)大培養(yǎng)。

6.根據(jù)權(quán)利要求4中所述的一種高密度戊糖片球菌的發(fā)酵方法，其特征在于，所述厭氧發(fā)酵過程中還包括補(bǔ)料階段，補(bǔ)料按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)包括：葡萄糖12～18％以及酵母自溶粉8～12％，余量為水；且所述厭氧發(fā)酵的培養(yǎng)條件為在30～37℃溫度下厭氧發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速為50～100rpm。

7.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的一種高密度戊糖片球菌的發(fā)酵方法，其特征在于，所述分離培養(yǎng)基按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)包括：酵母浸粉0.5-2.5％、胰蛋白胨1～2.5％、牛肉粉1～2.5％、葡萄糖1～2.5％，硫酸鎂0.01～1％、三水合乙酸鈉0.5～1.5％、硫酸錳0.005～0.35％、三水磷酸氫二鉀0.2％～1.0％、吐溫-80 0.1～0.8％、瓊脂粉0.5％～0.8％以及余量為水，并且所述分離培養(yǎng)基在115～121℃溫度下滅菌20～30min；

所述種子培養(yǎng)基按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)包括：葡萄糖1～3.5％、酵母粉1～2.5％、胰蛋白胨1～2％、泡敵0.05～0.1％以及余量為水，并且所述種子培養(yǎng)基在115～121℃溫度下滅菌20～30min，冷卻后于30～37℃溫度下靜置培養(yǎng)8～12h。

8.根據(jù)權(quán)利要求7中所述的一種高密度戊糖片球菌的發(fā)酵方法，其特征在于，所述戊糖片球菌單菌的保藏方法為：在種子培養(yǎng)液中加入甘油，其占所述種子培養(yǎng)基的10～30％，并置于-80～-50℃中保藏，得到甘油冷藏菌。