[發明專利]一種高結瘤固氮植物的培育方法

在審

• 申請號: 201910122103.8
• 申請日: 2019-03-18
• 公開（公告）號: CN109735561A
• 公開（公告）日: 2019-05-10
• 發明（設計）人: 紀洪濤;李霞;王延旭;王倩
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/54
• 代理公司: 石家莊輕拓知識產權代理事務所(普通合伙) 13128
• 代理人: 張培元

1.一種高結瘤固氮植物的培育方法，其特征在于：在植物體內分別過表達或者同時過表達序列表中的SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：5所示的核苷酸序列，獲得與正常植物相比具有高結瘤固氮能力的轉基因植物。

2.根據權利要求1所述的一種高結瘤固氮植物的培育方法，其特征在于：首先構建含有SEQ ID NO：1所述基因和/或含有SEQ ID NO：2所述基因和/或含有SEQ ID NO：3所述基因和/或含有SEQ ID NO：4所述基因和/或含有SEQ ID NO：5所述基因的重組表達載體，然后利用此重組表達載體構建轉化體，再利用此轉化體侵染目的植物，篩選陽性植株，獲得與正常植物相比根瘤數目增多的轉基因大豆。

3.根據權利要求2所述的一種高結瘤固氮植物的培育方法，其特征在于：所述重組過表達載體以pTF101為骨架載體。

4.根據權利要求2所述的一種高結瘤固氮植物的培育方法，其特征在于：所述重組過表達載體上含連接有35S強啟動子。

5.根據權利要求2所述的一種高結瘤固氮植物的培育方法，其特征在于：利用所述過表達載體轉化農桿菌K599獲得轉化體，然后再利用農桿菌K599介導的毛狀根轉化法獲得轉基因植物，篩選陽性植株得到與正常植物相比具有高結瘤固氮能力的轉基因植物。

6.根據權利要求1-5任一項所述的一種高結瘤固氮植物的培育方法，其特征在于：所述目的植物為蝶形花科植物。

7.根據權利要求1-5任一項所述的一種高結瘤固氮植物的培育方法，其特征在于：所述目的植物為大豆。

8.根據權利要求1所述的一種高結瘤固氮植物的培育方法，其特征在于：SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：5所示核苷酸的擴增引物對，其正向引物依次如序列表中SEQ ID NO：16～SEQID NO：20所示；其反向引物依次如序列表中SEQ ID NO：21～SEQ ID NO：25所示。