[發明專利]菌株及其應用，以及疫苗及其制備方法

在審

• 申請號: 201910118327.1
• 申請日: 2016-02-17
• 公開（公告）號: CN109652344A
• 公開（公告）日: 2019-04-19
• 發明（設計）人: 白雪;閆喜軍;魯榮光;胡博;吳威;柴秀麗;趙建軍;張海玲;張蕾;劉昊
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院特產研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K39/295;A61K39/104;A61K39/23;A61P1/00;A61P11/00;A61P31/04;A61P31/20;C12R1/385
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 張柳;趙青朵

本發明涉及生物技術領域，特別涉及菌株及其應用，以及疫苗及其制備方法。本發明提供一種水貂細小病毒性腸炎、出血性肺炎二聯滅活疫苗及其制備工藝，該疫苗的(菌)毒種為我國流行的水貂細小病毒毒株MEVB株和水貂銅綠假單胞菌G型DL15株、B型JL08株、C型WD01株、I型WF05株、F型DL03株，作為抗原的細小病毒性腸炎和銅綠假單胞菌菌株培養后分別用甲醛滅活后按比例混合，按比例加入氫氧化鋁膠配制而成，該疫苗免疫期為6個月，免疫保護率80％以上，可同時用于預防水貂細小病毒性腸炎和水貂出血性肺炎的，減少了養殖戶的免疫工作量和水貂應激反應，市場應用前景較好。

本申請是申請日為2016.02.17、發明名稱為“菌株及其應用，以及疫苗及其制備方法”、申請號為201610089542.X的發明的分案申請。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別涉及菌株及其應用，以及疫苗及其制備方法。

背景技術

毛皮動物主要指產品為制裘原料的動物。隨著經濟的發展、人們生活水平的提高和需求的不斷增長，中國毛皮業呈現出強勁的發展趨勢。我國毛皮動物養殖業主要集中在山東、河北、遼寧和黑龍江等地，養殖的品種主要有水貂、貉、狐、獺兔，年產水貂皮600萬張、狐貍皮200萬張，其中狐貍皮占世界總產量的35％，水貂皮占世界總產量的12％。經過多年的發展和積累，毛皮動物養殖已成為一項優勢產業，我國已成為世界上最大的毛皮產品生產國和出口國，它的發展不僅為國家賺取了大量外匯，還直接帶動了農業結構的調整，促進了農民增收，局部地區甚至已成為區域經濟的支柱性產業，對推動“三農”經濟發展起到了重要的作用。

水貂出血性肺炎是由銅綠假單胞菌引起水貂的一種急性傳染病，多發生于秋季溫暖潮濕，以咳嗽、呼吸困難、吐血、鼻出血為臨床特癥、以肺大面積出血、肺肝樣變、肺水腫為主要病變特征，發病率為20％-50％，死亡率為100％。病貂發病急,死亡快,常呈地方性暴發性流行。近年來由于水貂養殖規模和集約化程度明顯提高，水貂出血性肺炎的發病率顯著上升，該病危害程度逐年加深，已成為危害我國水貂養殖的主要傳染病之一。

鑒于該病的發病特點及該菌易產生耐藥性問題，用藥物治療該病往往很困難，滅活疫苗是預防該病的最有效方法，將水貂中流行的血清型的菌株滅活后制備成多價滅活疫苗，可有效預防同類血清型菌株引起的該病，“水貂銅綠假單胞菌分離株的生物學特性比較分析和血清型調查”(白雪，柴秀麗，閆喜軍，高晗，張海玲，趙建軍，張蕾，邵西群，羅國良，王長鳳)，“水貂出血性肺炎二價滅活疫苗及其制備方法”(專利號：ZL201010203879.1，閆喜軍、白雪、柴秀麗、羅國良、趙建軍、張海玲、邵西群、張蕾、高晗,)公開了我國引起水貂出血性肺炎的銅綠假單胞菌的主要血清型為G型和B型，并利用這2種血清型菌株DL15(國家菌種保藏號CGMCC NO.3811)和JL08(國家菌種保藏號CGMCC NO.3812)研制出了可用于預防水貂出血性肺炎的二價滅活疫苗，2011年該產品獲得了農業部的臨床試驗批件，并同時進行了臨床推廣應用。2016年獲得了國家新獸藥證書(三類)。

水貂病毒性腸炎是水貂腸炎細小病毒(Minkenteritis parvovirus,MEV)引起的以劇烈腹瀉為主要臨床特癥的急性烈性、高度接觸性傳染病，其死亡率高達80％以上，該病在世界范圍內廣泛流行，在自然條件下，不同品種和不同年齡的貂均有感染性，但幼貂的感染性極強，隨著特種養殖業的發展，病毒性腸炎已經成為危害水貂養殖的三大疫病之一，給養貂業帶來巨大的經濟損失，1947年由加拿大學者Schofield最早發現并報道了MEV引起的疾病。1981年姜廷秀等首先報道了我國發生水貂病毒性腸炎，此后該病逐漸蔓延全國,給養貂業帶來巨大的經濟損失。我單位吳威等用單克隆抗體對我國分離的水貂腸炎細小病毒進行系統分型，確定我國水貂腸炎細小病毒主要由B型細小病毒引起，在此基礎上選育出毒力穩定、免疫原性良好的病毒株MEVB株,并研制出水貂細小病毒滅活疫苗，2010年獲得了國家新獸藥證書(三類)，并迅速在市場上應用。使該病得到較好的控制。