[發明專利]菌株及其應用，以及疫苗及其制備方法在審
| 申請號： | 201910118327.1 | 申請日： | 2016-02-17 |
| 公開（公告）號： | CN109652344A | 公開（公告）日： | 2019-04-19 |
| 發明（設計）人： | 白雪;閆喜軍;魯榮光;胡博;吳威;柴秀麗;趙建軍;張海玲;張蕾;劉昊 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院特產研究所 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;A61K39/295;A61K39/104;A61K39/23;A61P1/00;A61P11/00;A61P31/04;A61P31/20;C12R1/385 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人： | 張柳;趙青朵 |
| 地址： | 130112 吉林省長*** | 國省代碼： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 水貂 細小病毒性腸炎 疫苗 菌株 制備 銅綠假單胞菌菌株 水貂出血性肺炎 生物技術領域 銅綠假單胞菌 按比例混合 出血性肺炎 免疫保護率 氫氧化鋁膠 甲醛滅活 滅活疫苗 市場應用 細小病毒 疫苗免疫 應激反應 制備工藝 養殖戶 抗原 毒種 毒株 工作量 配制 應用 預防 | ||
1.一種銅綠假單胞菌株，其特征在于，其保藏編號為CGMCC No.11990。
2.根據權利要求1所述的銅綠假單胞菌株在制備水貂出血性肺炎疫苗中的應用。
3.根據權利要求1所述的銅綠假單胞菌株在制備水貂細小病毒性腸炎、出血性肺炎二聯滅活疫苗中的應用。
4.一種水貂出血性肺炎疫苗，其特征在于，由權利要求1所述的銅綠假單胞菌株以及水貂銅綠假單胞菌G型DL15株、B型JL08株制得。
5.一種水貂細小病毒性腸炎、出血性肺炎的二聯滅活疫苗，其特征在于，由權利要求1所述的銅綠假單胞菌株以及水貂銅綠假單胞菌G型DL15株、B型JL08株和水貂細小病毒毒株MEVB株制得。
6.根據權利要求5所述二聯滅活疫苗的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
步驟1：取權利要求1所述的銅綠假單胞菌株以及水貂銅綠假單胞菌G型DL15株、B型JL08株分別接種于培養基培養后混合、滅活后制得滅活后銅綠假單胞菌五價苗半成品菌液；
步驟2：取水貂細小病毒毒株MEVB株接種細胞，收獲、滅活制得細小病毒半成品；
步驟3：取步驟1制得的滅活后銅綠假單胞菌五價苗半成品菌液與步驟2制得的細小病毒半成品混合制得混合液；
步驟4：取步驟3制得的混合液與佐劑混合。
7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟1中權利要求1所述的銅綠假單胞菌株以及水貂銅綠假單胞菌G型DL15株、B型JL08株分別經培養基培養后，所述混合的比例為1:1:1:1:1，混合后每株菌的菌數至少為40億CFU/mL。
8.根據權利要求6或7所述的制備方法，其特征在于，步驟2細小病毒半成品中細小病毒的含量為106.00TCID50。
9.根據權利要求6至8任一項所述的制備方法，其特征在于，步驟3所述步驟1制得的滅活后銅綠假單胞菌五價苗半成品菌液與步驟2制得的細小病毒半成品混合的比例為2:1。
10.根據權利要求6至9任一項所述的制備方法，其特征在于，步驟1所述的培養基在PYG培養基中添加MgSO4、枸櫞酸鈉、維生素、尿素、Na2HPO4緩沖鹽或KH2PO4緩沖鹽中的一種或多種；
步驟1中所述接種為按照PYG培養基體積的3％接種菌株；步驟2所述接種為按照CRFK細胞懸液體積的2％接種病毒步驟1或步驟2所述滅活采用甲醛滅活；所述甲醛的用量為菌液總量的0.2％；
步驟4所述佐劑為40％(w/v，以g/mL計)氫氧化鋁膠，步驟3制得的混合液與所述佐劑的混合比例為6:1。
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