[發(fā)明專利]單克隆抗體保護液及制備方法和應用、應用單克隆抗體保護液的試劑與免疫組化試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910109485.0
• 申請日: 2019-02-03
• 公開（公告）號: CN109870579B
• 公開（公告）日: 2022-02-11
• 發(fā)明（設計）人: 李文欣
• 申請（專利權）人: 遼寧邁迪生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/531;G01N33/68
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 侯瀟瀟

本發(fā)明提供了一種單克隆抗體保護液及制備方法和應用、應用單克隆抗體保護液的試劑與免疫組化試劑盒，涉及生物檢測技術領域，本發(fā)明提供的N1，N12?二乙酰精胺單克隆抗體保護液，包括PBS、Tween20、血清、海藻糖、Prolin、甘油、6?氨基乙酸、EDTA和CASEIN?Na。通過各特定組分及配比之間的相互配合使得其性質穩(wěn)定，使N1，N12?二乙酰精胺單克隆抗體保持良好的效價，延長單克隆抗體的有效期，從而有效的起到節(jié)約成本的作用。本發(fā)明提供的免疫組化試劑盒成本低廉，具有良好的特異性和可靠性，能夠準確的檢測病理切片中N1，N12?二乙酰精胺的水平，為二乙酰精胺的定性和定量檢測提供了更為可靠的方法。

技術領域

本發(fā)明涉及生物檢測技術領域，尤其是涉及一種單克隆抗體保護液及制備方法和應用、應用單克隆抗體保護液的試劑與免疫組化試劑盒。

背景技術

惡性腫瘤具有細胞分化和增殖異常、生長失去控制、浸潤性和轉移性等生物學特征，其發(fā)生是一個多因子、多步驟的復雜過程。在全球范圍內，腸癌是第三常見的惡性腫瘤，發(fā)病原因復雜，多與患者的飲食習慣以及潛在的遺傳性疾病有關。目前腸癌的治療手段包括外科手術，化療，放療以及靶向治療。腸癌患者若在早期發(fā)現，診斷時腫瘤細胞僅局限在結腸內壁中，那么通過手術切除，治愈率較高。但是腫瘤細胞一旦發(fā)生轉移就為腸癌的治療增加了許多難度，嚴重影響患者的生存。因此尋找和鑒定早期診斷腸癌的分子標記物十分關鍵。

N1，N12-二乙酰精胺(N1，N12-diacetylspermine,DiAcSpm)是尿液中發(fā)現的一種二乙酰多胺類物質，分子式為C₁₄H₃₀N₄O₂，在體內由鳥氨酸經鳥氨酸脫羧酶作用生成，是多胺代謝途徑中非常重要的一環(huán)。人細胞中都含有大量的多胺類物質。游離態(tài)的多胺，例如腐胺，亞精胺，精胺主要存在于細胞內池中。細胞中的多胺類物質經過代謝可以生成乙酰化衍生物，并經過代謝排泄于尿液中。在增殖活躍的組織中發(fā)現多胺類物質的生成和積聚都明顯增加，因此認為多胺在細胞增殖的過程中發(fā)揮關鍵作用。研究發(fā)現腫瘤患者尿液中多胺的排出量較健康人高。通過高效液相色譜在尿液中可分離出N1，N12-二乙酰精胺(N1，N12-diacetylspermine,DiAcSpm)。DiAcSpm是人尿液常規(guī)的組成成分，健康人尿液中僅為痕量，并且其含量的浮動范圍非常小。因此，尿液中游離多胺，乙酰化多胺等各自的含量以及總量作為腫瘤標記物并不十分可靠。

目前對于N1，N12-二乙酰精胺的檢測方法主要有酶聯(lián)免疫法、膠體金法和免疫比濁法等，現有方法均是通過直接檢測尿液中二乙酰精胺的含量來預測患腸癌的風險，主要用于早期篩查，得到的是一個患病的概率，無法準確地指導診斷。而應用到N1，N12-二乙酰精胺單克隆抗體的檢測方法成本較高，且抗體穩(wěn)定性較差，無法長期存放。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內容

本發(fā)明的第一個目的在于提供一種單克隆抗體保護液，以至少緩解現有技術中存在的技術問題之一。

本發(fā)明的第二個目的在于提供上述單克隆抗體保護液的制備方法，該方法工藝簡單、操作方便，且制備得到的單克隆抗體保護液性質穩(wěn)定，能夠有效保持抗體效價；

本發(fā)明的第三個目的在于提供上述單克隆抗體保護液的應用。

本發(fā)明的第四個目的在于提供一種試劑，該試劑性質穩(wěn)定，其中的單克隆抗體能夠在長期存放的條件下保持良好的效價。

本發(fā)明的第五個目的在于提供上述試劑的應用。

本發(fā)明的第六個目的在于提供一種免疫組化試劑盒，該試劑盒成本低廉，具有良好的特異性和可靠性，能夠準確的檢測病理切片中N1，N12-二乙酰精胺的水平，為二乙酰精胺的定性和定量檢測提供了更為可靠的方法。