[發明專利]DNA提取試劑、DNA的提取方法及DNA提取試劑盒

有效

• 申請號: 201910107329.0
• 申請日: 2019-02-02
• 公開（公告）號: CN109797148B
• 公開（公告）日: 2021-04-02
• 發明（設計）人: 何筠;張琦文;田暉
• 申請（專利權）人: 深圳清華大學研究院;安序源生物科技（深圳）有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 潘霞

1.一種DNA提取試劑，其特征在于，由裂解液及除雜劑組成，所述裂解液由終濃度為1M～5M的異硫氰酸胍、終濃度為0.01M～0.2M的Tris-HCl、最終質量體積百分數為1％～10％的N-月桂酰肌氨酸和磷酸緩沖液組成；所述除雜劑包括交聯聚乙烯基吡咯烷酮及聚乙烯基吡咯烷酮中的至少一種。

2.根據權利要求1所述的DNA提取試劑，其特征在于，所述裂解液中異硫氰酸胍的終濃度為2M～4M；及/或，所述裂解液中Tris-HCl的終濃度為0.05M～0.1M；及/或，裂解液中N-月桂酰肌氨酸的最終質量體積百分數為2％～5％。

3.一種DNA提取試劑盒，其特征在于，包括權利要求1或2所述的DNA提取試劑。

4.根據權利要求3所述的DNA提取試劑盒，其特征在于，還包括TENP緩沖液、TE緩沖液及洗滌液中的至少一種。

5.根據權利要求4所述的DNA提取試劑盒，其特征在于，其中，所述洗滌液包括第一洗滌液及第二洗滌液，所述第一洗滌液包括終濃度為0.01M～0.5M的磷酸鹽及0.5M～2M乙酸鉀；所述第二洗滌液包括終濃度為3M～5M乙酸鈉。

6.一種DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

用裂解液裂解樣本，得到待純化液，所述裂解液由終濃度為1M～5M的異硫氰酸胍、終濃度為0.01M～0.2M的Tris-HCl、最終質量體積百分數為1％～10％的N-月桂酰肌氨酸和磷酸緩沖液組成，所述樣本為微生物細胞；及

用除雜劑處理所述待純化液，得到DNA粗產物，其中，所述除雜劑包括交聯聚乙烯基吡咯烷酮及聚乙烯基吡咯烷酮中的至少一種。

7.根據權利要求6所述的DNA的提取方法，其特征在于，所述用裂解液裂解樣本的步驟中，所述樣本與所述裂解液的體積之比為1:2～8。

8.根據權利要求6所述的DNA的提取方法，其特征在于，所述用裂解液裂解樣本，得到待純化液的步驟包括：

將所述樣本與所述裂解液混合，并在56℃～95℃孵育，得到孵育液；及

將所述孵育液研磨，得到所述待純化液。

9.根據權利要求6～8任一項所述的DNA的提取方法，其特征在于，在所述用裂解液裂解樣本的步驟之前，還包括用生理鹽水或者磷酸鹽緩沖液清洗樣本以對所述樣本進行預處理的步驟。

10.根據權利要求6～8任一項所述的DNA的提取方法，其特征在于，在所述用除雜劑處理所述待純化液，得到DNA粗產物的步驟之后，還包括用第一洗滌液及第二洗滌液處理所述DNA粗產物，得到純化后的DNA的步驟；其中，所述第一洗滌液包括終濃度為0.01M～0.5M的磷酸鹽及0.5M～2M乙酸鉀；所述第二洗滌液包括終濃度為3M～5M乙酸鈉。