[發明專利]一種構建RBM17基因敲除的間充質干細胞細胞系的方法在審
| 申請號: | 201910099337.5 | 申請日: | 2019-01-31 |
| 公開(公告)號: | CN109777780A | 公開(公告)日: | 2019-05-21 |
| 發明(設計)人: | 齊國光;魯南;馬立新 | 申請(專利權)人: | 上海拉德鈁斯生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/10 | 分類號: | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/90 |
| 代理公司: | 廣州三環專利商標代理有限公司 44202 | 代理人: | 陳歡 |
| 地址: | 上海市青浦區*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 構建 間充質干細胞 質粒 基因敲除 傳代 篩選 陽性細胞 增效蛋白 基因 轉入 優化 | ||
1.一種構建RBM17基因敲除的間充質干細胞細胞系的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)構建用于表達SEQ ID NO:6所示的CREnhancer 2.0基因的質粒;
(2)構建用于表達sgRNA的質粒;
(3)將步驟(1)的質粒提前導入到間充質干細胞中,篩選得到陽性細胞后,再轉入步驟(2)的質粒。
2.根據權利要求1所述的構建RBM17基因敲除的間充質干細胞細胞系的方法,其特征在于,所述間充質干細胞為人骨髓間充質干細胞。
3.根據權利要求1所述的構建RBM17基因敲除的間充質干細胞細胞系的方法,其特征在于,所述的sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。
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