[發(fā)明專利]一種檢測口蹄疫病毒3AB抗體的試劑盒及其檢測方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910096803.4 | 申請日： | 2019-01-31 |
| 公開（公告）號： | CN109765366A | 公開（公告）日： | 2019-05-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 陳豪泰;張永光;孫躍峰;祁林林;張杰;潘麗 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所 |
| 主分類號： | G01N33/569 | 分類號： | G01N33/569;G01N33/535;G01N33/58;G01N33/68;G01N21/78 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務(wù)所 11569 | 代理人： | 劉奇 |
| 地址： | 730000 甘肅*** | 國省代碼： | 甘肅;62 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 口蹄疫病毒 試劑盒 酶標(biāo)板 種檢測 酶聯(lián)免疫技術(shù) 可視化檢測 試劑盒檢測 蛋白包被 技術(shù)手段 快速檢測 臨床應(yīng)用 酶標(biāo)二抗 檢測 抗體 靈敏 | ||
1.一種檢測口蹄疫病毒3AB抗體的試劑盒，其特征在于，包括酶標(biāo)板和酶標(biāo)二抗；
所述酶標(biāo)板經(jīng)口蹄疫病毒3AB蛋白包被。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述口蹄疫病毒3AB蛋白的包被濃度為1～2μg/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括洗滌液、血清稀釋液、底物顯色液、終止液、標(biāo)準(zhǔn)陽性血清和標(biāo)準(zhǔn)陰性血清。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述洗滌液包括磷酸鹽緩沖液，所述磷酸鹽緩沖液中含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.03～0.08％的吐溫-20，所述磷酸鹽緩沖液的pH值為7.2。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述血清稀釋液包括磷酸鹽緩沖液，所述緩沖液中含有脫脂奶粉，所述脫脂奶粉的濃度為45～55g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述底物顯色液包括TMB溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述所述終止液包括SDS溶液或硫酸溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述酶標(biāo)二抗包括豬的酶標(biāo)二抗或牛的酶標(biāo)二抗。
9.利用權(quán)利要求1～8任一項所述的試劑盒非診斷目的地檢測口蹄疫病毒3AB抗體的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)將所述血清稀釋液以體積比1:40稀釋血清樣本，得到稀釋血清；
2)向所述酶標(biāo)板的孔中加入步驟1)得到的稀釋血清，在15～30℃下孵育0.5～1.5h，棄去孔中的液體，洗滌液洗滌、拍干，得到第一拍干酶標(biāo)板；
3)向步驟2)得到的第一拍干酶標(biāo)板的孔中加入稀釋后的酶標(biāo)二抗，在15～30℃下孵育0.5～1.5h，棄去孔中液體，洗滌液洗滌、拍干，得到第二拍干酶標(biāo)板；
4)向步驟3)得到的第二拍干酶標(biāo)板的孔中加入底物顯色液，在15～30℃下避光顯色15～25min，當(dāng)孔中的顏色為藍色時，檢測到口蹄疫病毒3AB抗體，當(dāng)孔中的顏色為無色時，未檢測到口蹄疫病毒3AB抗體。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的檢測方法，其特征在于，所述酶標(biāo)二抗經(jīng)磷酸鹽緩沖液稀釋20000倍后，加入孔中。
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