[發(fā)明專(zhuān)利]一種葫蘆的組培快繁方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910095750.4
• 申請(qǐng)日: 2019-01-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109566420A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-04-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 繆倩;程兆榜;任春梅;季英華;楊柳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 劉奇

1.一種葫蘆的組培快繁方法，其特征在于，包括以下步驟：1)將去殼的葫蘆種子消毒，接種到無(wú)菌苗固體培養(yǎng)基中進(jìn)行無(wú)菌苗培養(yǎng)，得無(wú)菌苗；所述無(wú)菌苗固體培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括以下質(zhì)量百分比的組分：0.4～0.8％的瓊脂和2～4％的蔗糖，pH值為5.8；所述無(wú)菌苗培養(yǎng)包括暗培養(yǎng)2～4d后轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)；

2)剝離所述無(wú)菌苗的子葉節(jié)，將所述子葉節(jié)接種于叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，得叢生芽；所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基以MS為基本培養(yǎng)基，還包括：1～4mg/L的6-BA、0.1～0.4mg/L的ZT、分別占所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基質(zhì)量0.4～0.8％的瓊脂和2～4％的蔗糖，pH值為5.8；

3)分離所述叢生芽后接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，得葫蘆組培快繁苗；所述生根培養(yǎng)基以1/2MS為基本培養(yǎng)基，還包括：0.1～0.3mg/L的IBA、分別占所述生根培養(yǎng)基質(zhì)量0.4～0.8％的瓊脂和2～4％的蔗糖，pH值為5.8。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述組培快繁方法，其特征在于，步驟1)所述消毒包括依次進(jìn)行的第一消毒和第二消毒；所述第一消毒為將所述去殼的葫蘆種子用體積分?jǐn)?shù)為70～80％的乙醇水溶液浸泡70～90s；所述第二消毒為將第一消毒后的種子用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8～12％的次氯酸鈉水溶液消毒10～15min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述組培快繁方法，其特征在于，步驟1)所述光照培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為1500～3000lx，所述光照培養(yǎng)的光照時(shí)間為14～18h/d，所述光照培養(yǎng)的時(shí)間為5～9d。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述組培快繁方法，其特征在于，步驟2)所述剝離的方法，包括剪取所述無(wú)菌苗帶下胚軸的子葉，沿軸線(xiàn)縱切所述帶下胚軸的子葉，切去子葉上部1/3～3/5的組織，并剔除生長(zhǎng)點(diǎn)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述組培快繁方法，其特征在于，步驟2)所述接種為將所述子葉節(jié)近軸面朝上60～85°角斜插接種于所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述組培快繁方法，其特征在于，步驟2)所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的溫度為22～30℃，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為1800～2500lx，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的光照時(shí)間為14～18h/d。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述組培快繁方法，其特征在于，步驟3)所述叢生芽的高度為2～3cm。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述組培快繁方法，其特征在于，步驟3)所述生根培養(yǎng)的溫度為22～30℃，所述生根培養(yǎng)的光照強(qiáng)度為1800～2500lx，所述生根培養(yǎng)的光照時(shí)間為14～18h/d。