[發明專利]一種測定保健食品中非法添加化合物的方法

有效

• 申請號: 201910095491.5
• 申請日: 2019-01-31
• 公開（公告）號: CN109738565B
• 公開（公告）日: 2021-09-24
• 發明（設計）人: 徐敦明;賴國銀;黃蓬英;伊雄海;羅超;陳燕;張志剛
• 申請（專利權）人: 徐敦明
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 廈門市精誠新創知識產權代理有限公司 35218
• 代理人: 劉小勤

1.一種測定保健食品中非法添加化合物的方法，包括以下步驟：

步驟1：將非法添加化合物的標準樣品直接進樣到質譜儀，對非法添加化合物的標準樣品分別進行一級質譜分析和二級質譜掃描，得到目標化合物的質譜參數，作為定性判斷依據，并繪制標準曲線，作為定量計算依據；所述非法添加化合物為麻黃堿、西布曲明、N,N-雙去甲基西布曲明、N-單去甲基西布曲明、芬氟拉明、苯乙雙胍、吡咯列酮、格列吡嗪、瑞格列奈、格列齊特、格列本脲、甲苯磺丁脲、格列美脲、格列喹酮、格列波脲、可樂定、利血平、去羥基洛伐他汀、美伐他汀、洛伐他汀和辛伐他汀；

步驟2：稱取待測樣品的重量，向其中加入乙腈后進行超聲提取，提取液利用HLB固相萃取小柱，以甲醇水的混合溶液進行洗脫，收集洗脫液進行過濾，獲得進樣溶液；

步驟3：將步驟2得到的進樣溶液送入液相色譜質譜聯用儀，先經過液相色譜進行分離，之后進入質譜儀進行檢測，根據步驟1所述定性判斷依據確定待測樣品中添加的物質種類，根據步驟1所述定量判斷依據確定待測樣品中添加物質的量；其中液相色譜條件為：色譜柱為C18色譜柱；流動相為乙酸銨水溶液和甲醇；

所述步驟1和步驟3中，質譜儀的條件為：電噴霧電離離子源；掃描方式為正離子掃描；檢測模式為MRM模式；去溶劑氣流量為800-1000L/H；去溶劑氣溫度為600-700℃；

所述步驟3中液相色譜條件為：流動相：7-12mmol/L乙酸銨水溶液和甲醇；梯度洗脫：0～2min，30體積％甲醇；4min，60體積％甲醇；8min，70體積％甲醇；10min，94體積％甲醇；10.5～14min，30體積％甲醇；流速為0.2-0.4ml/min，柱溫為27-35℃；進樣量為1.5-2.5μL。

2.根據權利要求1所述測定保健食品中非法添加化合物的方法，其特征在于：所述保健食品為減肥類、降脂類、降糖類或降壓類保健食品的口服液、顆粒、片劑、硬膠囊或軟膠囊。

3.根據權利要求1所述測定保健食品中非法添加化合物的方法，其特征在于：所述步驟1和步驟3中，質譜儀的條件為：電噴霧電離離子源；掃描方式為正離子掃描；檢測模式為MRM模式；去溶劑氣流量為900L/H；去溶劑氣溫度為650℃。

4.根據權利要求1或2所述測定保健食品中非法添加化合物的方法，其特征在于：所述步驟2中，超聲提取時間為10-20min。

5.根據權利要求4所述測定保健食品中非法添加化合物的方法，其特征在于：所述步驟2中，超聲提取時間為15min。

6.根據權利要求1或2所述測定保健食品中非法添加化合物的方法，其特征在于：所述步驟2包括：2a)稱取0.5g待測樣品，其中對于顆粒或片劑進行研細，對于硬膠囊或軟膠囊取內容物，對于液體試樣取1g并加入1mL飽和氯化鈉溶液；2b)將待測樣品于50mL離心管中，加入10mL乙腈，渦旋混勻后超聲提取15min，以5000r/min離心10min，取乙腈層至另一離心管中；殘渣再用10mL乙腈超聲提取15min，以5000r/min離心10min；合并乙腈層，氮吹至0.5mL后，加入10mL水渦旋，待凈化；2c)將Oasis HLB固相萃取小柱接于固相萃取裝置上，依次用5mL甲醇、5mL水活化小柱，用5mL 5體積％甲醇水平衡后，將待凈化的樣品溶液加入OasisHLB固相萃取小柱內，控制流速1滴/s，待樣品溶液流盡后，用4mL 5體積％甲醇水溶液淋洗Oasis HLB固相萃取小柱，最后用90體積％甲醇水溶液洗脫Oasis HLB固相萃取小柱，收集洗脫液至5mL容量瓶中，定容至刻度，經0.16-0.19μm濾膜過濾后作為進樣溶液。

7.根據權利要求1或2所述測定保健食品中非法添加化合物的方法，其特征在于：所述非法添加化合物的標準曲線皆呈線性關系，相關系數均大于0.995，回收率在61.8％～109.3％之間，相對標準偏差均不高于15％，同一種非法添加化合物在不同基質的方法檢出限在3～80μg/kg之間。